单味中药抗大肠杆菌内毒素的实验研究

涂可斌，余声文

(1.咸宁市咸安区妇幼保健院，湖北咸宁437000;2.湖北省中医院)

内毒素是细胞壁外膜结构中的脂多糖，能引起发热、休克、器官损伤等多种病理变化和各种并发症。中医中内毒素是“毒”邪的一个重要组成部分，是引起卫气营血及其传变的一个重要病因。因而，如果利用中医辨证施治，复方用药特长，对内毒素引起的多方面病理损害进行多靶点的防治将具有重要临床意义。我们采用琼脂二倍稀释法进行体外抗菌实验研究，以寻找有效抗大肠杆菌内毒素的单味中药。

1 材料与方法

1.1 药材提取

所用玻璃仪器洗液浸泡1夜，常水洗净，蒸馏水冲洗3遍，烤箱烤干，然后250℃干热灭菌2h备用。生大黄、蒲公英、茵陈、赤芍、金银花、虎杖、黄连、连翘、黄答、丹参、甘草、桅子、积实、白头翁、败酱草、柴胡(购于药店)分别用适量甲醇冲洗，然后用适量甲醇浸泡1h，超声30min，过滤;加入甲醇，再超声30min，过滤，合并2次滤液，回收甲醇。用肉汤溶解残渣，并定容至试验所需浓度。

1.2 细菌培养

取冻干大肠杆菌ATCC25922安培1支用2ml无菌肉汤溶解，取1环接种于固体培训基地中，37℃培养16～18h。然后，取1个菌落溶于2ml肉汤中，37℃培养6h，取0.1ml溶于100ml肉汤中备用。

1.3 不同中药抗菌试验

用二倍稀释法对各种中药提取液分别进行2倍稀释，然后在不同浓度药材提取物试管中加入等体积热液体琼脂培养基，混匀并斜放，待凝固后在每支试管中划线接种大肠杆菌1环，37℃培养24h，以细菌生长的状况作为判断指标，观察抗菌作用结果。接种区光滑无可见菌落为具抗菌作用;接种区可见大片细菌生长为无抗菌作用。实验同时设阳性对照和阴性对照。阳性对照:1ml肉汤加1ml液体琼脂在试管中混匀，斜放，待凝固后在试管中接种大肠杆菌1环;阴性对照:1ml肉汤加1ml液体琼脂在试管中混匀，斜放，不接种大肠杆菌。阳性对照与阴性对照和样品同时培养。

2 结果

结果阳性对照有菌落生长，阴性对照无菌落生长，样品抗菌作用结果见表1。+:表示有白色菌落生长;－:表示无白色菌落生长。

表1 不同种类中药抗大肠杆菌试验结果(g/ml)

3 讨论

各种感染性疾病临床常选用不同种类的抗生素，但一般抗生素没有抗内毒素的作用，单纯使用抗生素，仅能抑制或杀灭致病菌，尽管其能有效控制菌血症，但因其不能破坏内毒素，反而使溃破细菌大量释放内毒素，内毒素症状随菌体溃解而加重，使发热期延长，并发症发生率增加，如循环障碍、休克以及弥漫性血管内凝血(DIC)等，从而导致病人的死亡率仍然很高。为研究中药对细菌内毒素的释放是否有抑制作用，是否会引起内毒素血症，我们选择了几种抗菌作用较强的中药进行了体外抗大肠杆菌内毒素实验。

实验结果显示，不同种类的中药对大肠杆菌抗菌作用不同。黄连、赤芍抗菌作用最强，生大黄、虎杖、连翘、败酱草次之，其它品种则更弱一些。实验结果也表明:①并不是只有清热解毒类中药具抗菌作用，其它类中药也具抗菌作用，如甘草属补气类，丹参属活血类，枳实属行气类等均具有一定的抗菌作用;②并不是清热解毒类中药抗菌作用最强，如赤芍属清热凉血类，其抗菌作用强度与公认的抗菌作用最强中药黄连一致;③不同功效种类的中药均具有一定的抗菌作用，有助于说明为什么中医临床能同病异治，异病同治的特点。因为在某一方面，不同功效种类的中药往往具有相同的功效。从发展的观点看，中药按单一功效分类如一成不变，将不利于中医药临床与理论的提高。我们寻找具有较强抗菌作用的单味药，然后以此为基础，再结合中医组方理论组成新的复方，将能有效避免抗生素引起的不良后果并治疗因细菌大量释放内毒素引起的内毒素血症。