血清IL-34、CRP 及ALB 水平对克罗恩病疾病活动度的预测价值*

陈冰倩，黄 伟，杨君伶，刘肇修

（南通大学附属医院消化内科，江苏 226001）

克罗恩病（Crohn’s disease,CD）为慢性、复发性炎症性肠病,好发于中青年,可累及胃肠道的任何部位,可引起肠道狭窄梗阻、瘘管形成、脓肿和穿孔等并发症,严重影响患者生活质量[1]。克罗恩病有多类药物可供选择,如糖皮质激素、免疫抑制剂及生物制剂,主要依据疾病严重程度及对治疗的反应选择用药。克罗恩病活动度评判主要依据临床症状及内镜检查,但内镜检查是侵入性操作,费用较贵,且需行肠道准备。因此,寻找无创性生物学标志物评估疾病严重度具有重要意义。

白细胞介素-34（IL-34）是集落刺激因子-1 受体的生理配体之一,各种如DNA 损伤因子、致炎因子以及病毒感染等刺激因素可诱导上皮细胞、免疫细胞、神经元细胞及成骨细胞合成、分泌IL-34。IL-34 与类风湿性关节炎及胶原诱导性关节炎的疾病严重程度正相关[2-3],而在不同类型肿瘤中IL-34 的作用有所不同[3]。在炎症性肠病活动期患者及小鼠实验性结肠炎的病变黏膜中,IL-34 mRNA 及蛋白表达水平明显增高,但具体机制尚不清楚[4-5]。C 反应蛋白（CRP）及血清白蛋白（ALB）是预测CD 疾病活动度的传统指标。本文选择我院2020 年7 月—2022年10 月收治的110 例CD 患者,评估血清IL-34、CRP、ALB 水平预测CD 疾病活动度的临床价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料 110 例CD 患者（CD 组）,均符合2018 炎症性肠病诊断与治疗共识关于CD 诊断标准,其中男性76 例,女性34 例,平均年龄31.84±11.00 岁,根据克罗恩病疾病活动指数（Crohn’s disease activity index,CDAI）评分[6],110 例CD 患者中处于疾病缓解期41 例,轻度活动期20 例,中度活动期42 例,重度活动期7 例。另选择同期在我院体检的55 例健康体检者为对照组,其中男性36 例,女性19 例,平均年龄34.69±10.58 岁。两组性别、年龄比较,差异均无统计学意义（P＞0.05）。所有研究对象签署知情同意书。

1.2 血清IL-34、CRP 及ALB 水平检测 清晨空腹采集外周静脉血3 mL,凝固后3 000 r/min 离心15 min,收集血清于-80 ℃冰箱保存待测。实验前于室温冰上融化,采用酶联免疫法（ELISA）检测血清IL-34、CRP 及ALB 水平。试剂盒均来源于上海将来实业股份有限公司。

1.3 统计学处理 应用SPSS 22.0 统计学软件进行数据分析。利用单个样本K-S 法检验计量资料是否符合正态分布,非正态分布计量资料以M（P25,P75）表示,两组间比较采用Mann-Whitney U 检验,多组间比较采用Kruskal-Wallis 检验。血清IL-34、CRP、ALB 水平与CD 疾病活动度的关系采用Spearman相关性分析;绘制血清IL-34、CRP、ALB 水平判断CD 疾病活动度的受试者工作特征（ROC）曲线,计算曲线下面积（area under curve,AUC）和最佳临界值。P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组血清IL-34、CRP、ALB 水平比较 CD 组血清IL-34、CRP 水平高于对照组,ALB 水平低于对照组,差异均有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1 两组血清IL-34、CRP 及ALB 水平比较

2.2 不同活动度患者血清IL-34、CRP、ALB 水平比较 随着疾病活动度增加,血清IL-34、CRP 水平增高,ALB 水平降低;不同活动度CD 患者血清IL-34、ALB、CRP 水平比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

表2 不同活动度CD 患者血清IL-34、ALB、CRP 水平比较

2.3 血清IL-34、CRP、ALB 水平与CD 疾病活动度相关性分析 IL-34、CRP 水平与CD 疾病活动度分级呈正相关,相关系数r 分别为0.526、0.613,而ALB 水平与疾病活动度呈负相关,相关系数r 为-0.400,均有统计学意义（P＜0.001）。

2.4 CRP、IL-34、ALB 水平评估CD 活动度的效能分析 CRP、IL-34、ALB 水平诊断CD 疾病活动度的AUC 分别为0.957[95% CI（0.900,0.986）]、0.855[95% CI（0.775,0.915）]和0.912[95% CI（0.842,0.957）]。见图1。CRP 临界值取10.6 mg/L 时,诊断CD 活动度的敏感度和特异度分别为87.8%和94.2%;IL-34 临界值取41.6 pg/L 时,敏感度和特异度分别为68.3%和92.8%;ALB 临界值取39.6 g/L时,敏感度和特异度分别为100.0%和69.6%,CRP及IL-34 诊断特异度优于ALB。

图1 CRP、IL-34、ALB 判断CD 疾病活动度的ROC 曲线

3 讨论

本研究结果显示,与对照组比较,CD 组患者血清中IL-34 水平明显增高;与缓解期患者比较,活动期患者血清中IL-34 水平明显增高,且与疾病严重程度呈正相关。ROC 曲线分析提示血清IL-34、CRP、ALB 水平对判断CD 的疾病活动度有一定预测价值,IL-34 对CD 活动度的诊断特异度较高。

近年来,CD 治疗目标不断提高,从最初的症状应答和缓解到炎症标志物恢复正常,再到内镜下甚至组织学愈合。有诸多评分系统用于评估CD 疾病活动度,包括评估临床症状、内镜下活动度及组织学活动度的评分体系。CDAI 是由美国克罗恩病协作组提出,根据观察1 周内病情的8 个变量计分,能较准确地评估临床应答及缓解情况,被广泛用于临床科研中。一般将CDAI＜150 分定义为临床缓解,而评分较前下降≥70 分定义为治疗有效。值得注意的是,临床缓解与内镜下黏膜愈合并不完全一致。部分CD患者缺乏明显的临床症状,但肠道病变在缓慢发展。研究表明,黏膜愈合对于改善CD 预后,降低手术率有重要意义。因此仅仅根据CDAI 评分判定CD 疾病活动度是不全面的[7]。

既往研究表明,白细胞介素6（IL-6）、白细胞介素10（IL-10）及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）等炎症因子在炎症性肠病活动期患者血清中明显升高[4-5,8-9],且与疾病的严重程度密切相关[10-11],部分炎症因子已成为炎症性肠病的新靶点[12-13]。CRP 是由肝细胞产生的五聚体急性期蛋白,对炎症负荷的变化敏感,是评估炎症性肠病病情活动的常用指标[14-16]。最新研究发现,CRP 12 mg/L 可作为区分中度和重度溃疡性结肠炎的标准[17]。本研究结果显示,CRP 10.6 mg/L对判断CD 活动性及严重程度具有预测价值[18-19]。血清白蛋白（ALB）是重要的营养指标,其合成速率直接受急性感染的影响,可作为评价炎症性肠病肠道粘膜愈合程度的重要指标[16]。研究表明,ALB 可能对识别潜在儿童克罗恩病有诊断价值[20]。本研究结果显示CD 患者ALB 水平与CD 的疾病活动度相关。

IL-34 是由多种细胞产生的细胞因子,在健康人肠道中表达极低,在炎症性肠病活动期患者及小鼠实验性结肠炎的病变黏膜中IL-34 表达水平明显增高,提示IL-34 在炎症性肠病的发生发展中发挥重要作用[21]。体外细胞模型研究发现,TNF-α 可激活肠黏膜组织固有层单个核细胞NF-κB 信号通路,上调IL-34 表达[5];而后者又可通过ERK1/2 途径促进固有层单个核细胞分泌TNF-α、IL-6 等炎症介质以及肠上皮细胞分泌CCL20 趋化因子,提示IL-34 可能通过致炎因子正反馈调节机制诱导及维持肠道炎症慢性化[4,22]。然而,本课题组前期研究发现,在急性炎症损伤期和修复期,IL-34 缺乏导致实验性小鼠结肠炎疾病活动度及肠道黏膜组织学损伤加重,而小鼠肠炎相关性肠癌的发生率显著增加,提示IL-34 可能在炎症性肠病中发挥保护作用[23]。本研究发现血清IL-34 水平与CD 患者疾病严重程度密切相关,对评估CD 活动度具有预测价值,其特异度高于血清白蛋白。

综上所述,血清CRP、IL-34 及ALB 水平对CD临床疾病活动度有较高预测价值,IL-34 诊断特异性优于ALB,有望成为评估CD 疾病活动度新的血清学指标。