金铁锁愈伤组织花色苷的稳定性研究

韦红边，李小兰，张明生，刘贵贤，高晓峰，徐佳瑜

(贵州大学 生命科学学院，贵州 贵阳 550025；山地植物资源保护与种质创新省部共建教育部重点实验室，贵州 贵阳 550025)



·研究报告·

金铁锁愈伤组织花色苷的稳定性研究

韦红边，李小兰，张明生*，刘贵贤，高晓峰，徐佳瑜

(贵州大学 生命科学学院，贵州 贵阳 550025；山地植物资源保护与种质创新省部共建教育部重点实验室，贵州 贵阳 550025)

以金铁锁红色愈伤组织为材料，用1%盐酸-甲醇提取花色苷，研究其在不同温度、光照、pH、可溶性糖、还原剂、氧化剂、防腐剂和金属离子等条件下的稳定性。实验结果表明，金铁锁花色苷在温度为4～60℃及偏酸性条件下较稳定；光照对花色苷具有较强的破坏作用，应避光存放；氧化剂和抗坏血酸对其影响较大，但在还原剂作用下较稳定。此外可溶性糖及防腐剂对愈伤组织有一定的增色作用；K+、Zn2+、Mn2+、Mg2+、Ca2+的存在对其稳定性没有较大影响，但Cu2+、Fe3+对其有明显的破坏作用，因此在储存愈伤组织或花色苷时应避免使用铜器和铁器。

金铁锁；愈伤组织；花色苷；稳定性

金铁锁(PsammosilenetunicoidesW. C. Wu et C. Y. Wu)为石竹科金铁锁属，中国特有单属种多年生草本植物。通常以根入药，用于风湿痹痛、胃脘冷痛、跌打损伤、外伤出血等症，是云南白药的重要成分之一[1]。目前，国内外关于中药材及其他植物色素诱导[2]、积累[3]及稳定性[4]的研究时有报道。笔者在前期研究中发现，金铁锁的外植体能被诱导产生富含花色苷的愈伤组织，并建立其愈伤组织培养体系。

花色苷是一种存在于植物细胞液泡中的水溶性天然色素，不仅颜色艳丽，而且还具备黄酮类所特有的生理保健功能：清除体内自由基、抗肿瘤、抗炎和保护肝脏等。因此，其在食品、化妆品和医药行业中备受推崇[5]。但花色苷的实际应用还存在很多限制，温度、光照、pH、金属离子等均会影响其稳定性[6]，所以开展花色苷类色素稳定性的研究十分必要。目前，有关金铁锁愈伤组织花色苷稳定性的研究未见报道。本试验以金铁锁红色愈伤组织为材料，以1%盐酸-甲醇为提取剂，探索不同因素对花色苷稳定性的影响，以期为金铁锁色素的开发和利用奠定理论与技术基础。

1　材料与方法

1.1实验材料

金铁锁(PsammosilenetunicoidesW.C.Wu et C.Y.Wu)红色愈伤组织，由贵州大学植物生理学实验室培养获得。

HCl、NaOH、Na2SO3、H2O2、KCl、CaCl2、CuCl2·2H2O、MnSO4·H2O、MgCl2·6H2O、ZnSO4·7H2O、FeCl3、苯甲酸钠、山梨酸钾、抗坏血酸、葡萄糖、蔗糖、甲醇等所有试剂均为分析纯。

1.2实验设计

本实验设计不同温度、光照、pH、可溶性糖、金属离子、还原剂、氧化剂和防腐剂等条件考查金铁锁愈伤组织色素稳定性，具体处理参考邸翔[7]和闫颖[8]的实验方法并稍作修改。

1.2.1 温度实验取2 mL花色苷溶液5份，用1%盐酸-甲醇稀释至25 mL，分别于4℃、20℃、40℃、60℃及80℃的恒温水浴中，每隔1 h取样一次，冷却至室温后，用紫外分光光度计在其最大吸收波长处测定吸光值，每次实验重复3次。

1.2.2光照实验取0.5 mL花色苷溶液2份，用1%盐酸-甲醇稀释至25 mL，分别于黑暗和光照条件下，每隔12 h取样一次，测定吸光值，每次实验重复3次。1.2.3pH实验取0.5 mL花色苷溶液13份，用1%盐酸-甲醇稀释至10 mL，用0.1 mol/L的HCl和NaOH调节溶液pH值从1～13，每隔1 h取样一次，观察颜色变化并测定其吸光值，每次实验重复3次。

1.2.4可溶性糖实验取0.5 mL花色苷溶液各7份，用1%盐酸-甲醇稀释至20 mL备用。各配置1%、3%、5%、10%、20%和30%的蔗糖溶液与葡萄糖溶液，分别取5 mL不同浓度的可溶性糖溶液加入到花色苷溶液中混匀，对照液为稀释的20 mL花色苷溶液与5 mL蒸馏水的混合液，每隔1 h取样一次，测定其吸光值，每次实验重复3次。

1.2.5还原性实验取0.5 mL花色苷溶液6份，用1%盐酸-甲醇稀释至20 mL，各配置0.02%、0.05%、0.1%、0.5%和1.0%的Na2SO3溶液，分别取5 mL不同浓度的Na2SO3溶液加入到花色苷溶液中混匀，对照液与可溶性糖实验相同，每隔1 h取样一次，测定其吸光值，每次实验重复3次。

1.2.6抗坏血酸实验取0.5 mL花色苷溶液6份，用1%盐酸-甲醇稀释至20 mL，各配置0.05 g/L、0.1 g/L、0.5 g/L、1.0 g/L和2.0 g/L的抗坏血酸溶液，分别取5 mL不同浓度的抗坏血酸溶液加入到花色苷溶液中混匀，对照液与可溶性糖实验相同，每隔1 h取样一次，测定其吸光值，每次实验重复3次。

1.2.7氧化性实验取0.5 mL花色苷溶液7份，用1%盐酸-甲醇稀释至20 mL，各配置0.01%、0.1%、0.5%、1.0%、2.0%和3.0%的H2O2溶液，分别取5 mL不同浓度的H2O2溶液加入到花色苷溶液中，对照液与可溶性糖实验相同，每隔1 h取样一次，测定其吸光值，每次实验重复3次。

1.2.8防腐剂实验取0.5 mL花色苷溶液各6份，用1%盐酸-甲醇稀释至20 mL备用。各配置10 mg/L、20 mg/L、40 mg/L、60 mg/L和80 mg/L的苯甲酸钠溶液与山梨酸钾溶液，分别取5 mL不同浓度的防腐剂溶液加入到花色苷溶液中，对照液与可溶性糖实验相同，每隔1 h取样一次，测定其吸光值，每次实验重复3次。

1.2.9金属离子实验取0.5 mL花色苷溶液各8份，用1%盐酸-甲醇稀释至20 mL备用。分别加入5 mL浓度为0.05 mol/L的K+、Zn2+、Mn2+、Mg2+、Ca2+、Cu2+、Fe3+金属离子溶液，对照液与可溶性糖实验相同，每隔1 h取样一次，测定其吸光值，每次实验重复3次。

1.3试验方法

1.3.1花色苷提取花色苷提取参照李颖畅等[9]的方法并进行改进。称取70.2 g金铁锁紫红色愈伤，以体积分数为1%盐酸-甲醇作提取剂，料液比1∶10，30℃条件下浸提金铁锁愈伤组织花色苷20 h，重复提取3次，合并滤液。过滤后于40℃旋转蒸发仪旋转蒸发得红色浸膏，黑暗中冷藏备用。

1.3.2花色苷紫外-可见光谱测定将上述红色浸膏0.323 g溶于35 mL 1%盐酸-甲醇得到0.09 g/mL花色苷溶液。取0.5 mL花色苷溶液移入25 mL棕色容量瓶定容，以1%盐酸-甲醇为对照，将花色苷提取液在190～690 nm波长范围内扫描。

1.3.3花色苷粗提率测定花色苷粗提率(%)=(M1/M2)× 100%。式中M1为红色固体(g)，M2为愈伤组织干重(g)。

2　结果与分析

2.1金铁锁花色苷的紫外-可见光吸收光谱分析

植物花色苷进行光谱分析时分别在280 nm～290 nm紫外区和500 nm～540 nm可见光区有1个较强的吸收峰[10]。本实验提取的金铁锁色素样品在紫外和可见光区分别有1个较强的吸收峰，其波长为280 nm和530 nm(如图1所示)，由此可见，金铁锁色素属于花色苷类物质，其最大波长为530 nm。

图1　金铁锁花色苷提取液吸收光谱图Fig.1　Spectrogram for anthocyanin extracting solution of P. tunicoides

2.2温度对金铁锁花色苷稳定性的影响

图2　温度对花色苷稳定性的影响Fig.2　Effect of temperature on anthocyanin stability

金铁锁愈伤组织花色苷在不同温度下的稳定性不同，其吸光值在短时间内的变化见图2。

结果表明：在同一时间点，4～60℃范围内，随着温度的升高，金铁锁花色苷的吸光值变化大致为先上升后下降的趋势。其中20℃时吸光值相对较高。且各温度条件下，花色苷溶液短时间(1 h～5 h)内吸光值增减幅度不大，说明金铁锁花色苷适宜在20℃温度下短时间保存。当温度升高到60℃时，各时间段的金铁锁溶液吸光值大幅度降低，均低于4℃、20℃及40℃条件下的吸光值。原因可能是花色苷的2-苯基苯并吡喃阳离子(AH+)失电子以离子化醌式碱形式稳定存在的反应是放热反应，而温度的升高将促进吸热反应(花色苷水解及糖苷开环等)的进行，引起花色苷的降解，最终分解为酚酸类和醛类等物质[11-12]。

当温度升高到80℃时，吸光值却急剧增加，可能是高温条件加快提取液的蒸发，导致溶剂减少，花色苷浓度增大。此时花色苷颜色由红色逐渐变成了褐色，说明在该温度时，金铁锁色苷极不稳定，易分解变性。综合表明，金铁锁愈伤组织花色苷耐热性较差，20℃时稳定性较好。

2.3光照对金铁锁花色苷稳定性的影响

光照不仅对花色苷的形成有明显的促进作用，而且对花色苷的稳定性有较大影响。随着光照增强会促使花色苷在细胞中的积累，但同时又会加速花色苷的降解[13]。结果表明(如图3示)：在黑暗条件下，金铁锁花色苷吸光值变化随着时间的延长呈现相对稳定的趋势，颜色一直保持红色不变，且溶液吸光值均高于光照条件的吸光值。在光照条件下，随着时间的延长，花色苷结构受破坏的程度加大，吸光值大幅度降低。同时颜色也发生明显变化，由红色变为浅红色，表明花色苷在光照条件下稳定性较差。因此，在储存和运输金铁锁花色苷的过程中应尽量避免长时间的阳光直射。

图3　光照对花色苷稳定性的影响Fig.3　Effect of light on anthocyanin stability

2.4pH对金铁锁花色苷稳定性的影响

在溶液介质中， 由于花色苷种类、羟基数目和糖结合位置的不同，花色苷颜色及吸光值会随pH的不同而发生变化[14]。

pH对花色苷吸光值的影响见图4： 当pH < 3时，金铁锁花色苷吸光值均较高，在pH为2达到最大值，所以金铁锁花色苷适宜在偏酸性条件下保存。随着pH值减小到1，花色苷吸光值降低，说明强酸对金铁锁花色苷有明显的破坏作用。在pH范围为4～9，花色苷吸光值降至最低。而随着pH值的增加(pH>9)，金铁锁花色苷吸光值又快速增高。与pH值相对应的花色苷色调变化如图5所示，pH<4，金铁锁色素以AH+形式存在，表现为红色；pH为5～7，色素发生水解或开环反应，形成甲醇假碱或查尔酮，颜色变淡；pH>8，色素为离子化醌式碱，蓝色由浅变深。

图4　pH对花色苷稳定性的影响Fig.4　Effect of pH on anthocyanin stability

图5　pH对花色苷颜色的影响Fig.5　Effect of pH on anthocyanin color

2.5可溶性糖对金铁锁花色苷稳定性的影响

糖对花色苷稳定性的影响与糖浓度和反应阶段有关。由图6和图7可知，一定浓度的蔗糖和葡萄糖对金铁锁花色苷有保护作用。与对照组相比，在一定的时间内，添加各浓度(1%～30%)的蔗糖因子均对金铁锁花色苷有增色效果。添加3%蔗糖的花色苷溶液在5 h吸光值最大，花色苷稳定性最好。当时间超过5 h，在6 h时发现吸光值降低，即所有实验组溶液的吸光值均小于1～5 h的实验组吸光值。说明蔗糖只在短时间内对维持色素的稳定性有效，随着时间的延长金铁锁花色苷仍会降解。当添加浓度为3%的葡萄糖时，色素增色效果显著。如图7所示，在同一时间，葡萄糖浓度在3%时对金铁锁花色苷的增色作用较为明显。而高浓度的葡萄糖在短时间内对维持金铁锁花色苷稳定性没有明显的促进作用。这可能是由于糖不仅可以作为渗透调节物质，调节水分活度，还能作为结构物质与花色苷发生糖化配基反应，保护发色团，延缓其降解速度[15]。但超过某一界限后，高浓度的糖及糖降解物则可能加速花色苷降解，在反应初期，糖类能提高花色苷的稳定性，减缓其降解速率；但随着反应的进行，糖类的降解产物开始促进花色苷的降解。因此将浓度为3%的蔗糖或3%的葡萄糖作为金铁锁花色苷的辅色因子，维持花色苷结构及色调的稳定性。

图6　蔗糖对花色苷稳定性的影响Fig.6　Effect of sucrose on anthocyanin stability

图7　葡萄糖对花色苷稳定性的影响Fig.7　Effect of glucose on anthocyanin stability

2.6还原剂对金铁锁花色苷稳定性的影响

常见的一些还原剂对色素稳定性影响较大，一般有增色的效果[16]。本试验通过与对照组的比较发现，不同浓度的Na2SO3在短时间内具有增色功能(图8)。在2 h～4 h时间段内，随着还原剂Na2SO3浓度的增加，花色苷的吸光值变化幅度不大，说明高浓度的还原剂能维持金铁锁花色苷的稳定性。时间超过4 h后，花色苷吸光值急剧下降，但实验组的吸光值仍高于对照组吸光值。因此，生产中可添加还原剂Na2SO3来保护花色苷的稳定性。

2.7抗坏血酸对金铁锁花色苷稳定性的影响

由图9可知，与不添加抗坏血酸的对照组比较，添加Vc的各实验组吸光值均减小，说明抗坏血酸对金铁锁花色苷稳定性具有破坏作用。在0 h～5 h时间段内，不管高浓度还是低浓度的抗坏血酸对花色苷的降解效果相差不大。但超过5 h后，随着抗坏血酸浓度的增加，金铁锁花色苷的降解速度加快，吸光值逐渐减小。由此表示高浓度的抗坏血酸不宜与金铁锁花色苷长时间接触，所以，在金铁锁花色苷的生产加工和运输过程中应尽量避免添加抗坏血酸。

图8　还原剂对花色苷稳定性的影响Fig.8　Effect of reductant on anthocyanin stability

图9　抗坏血酸对花色苷稳定性的影响Fig.9　Effect of Vc on anthocyanin stability

2.8氧化剂对金铁锁花色苷稳定性的影响

氧化剂对金铁锁花色苷稳定性有着较大的影响(图10)。随着H2O2浓度的增加，金铁锁花色苷易被氧化褪色(由红色变为无色)，吸光值也急剧降低。与对照组相比，H2O2浓度低至0.01%时，H2O2在5 h内对金铁锁花色苷的破坏作用相对较小。而当H2O2浓度大于0.01%后色素稳定性降低，吸光值急剧减小。且添加的H2O2浓度越高，花色苷随时间降解的速度越快。原因可能是H2O2对花色苷的C2位能直接进行亲和攻击，使花色苷发生水解反应，开环生成无色查尔酮[17]。综上说明金铁锁花色苷抗氧化能力较差，不宜与H2O2接触。

图10　氧化剂对花色苷稳定性的影响Fig.10　Effect of oxidant on anthocyanin stability

2.9防腐剂对金铁锁花色苷稳定性的影响

在金铁锁花色苷溶液中各加入不同浓度的苯甲酸钠和山梨酸钾后，每隔1 h测定其含量，结果表明两种防腐剂对花色苷都具有一定的增色效应(图11和图12)。苯甲酸钠在其浓度为10 mg/L时增色效果尤为明显，原因可能是色素与防腐剂产生协同效应[18]。随着苯甲酸钠浓度的增加，金铁锁花色苷吸光值呈下降趋势，说明苯甲酸钠与花色苷的协同作用受浓度和时间影响较大。而山梨酸钾对金铁锁花色苷稳定性较好。如图12可知，对照组金铁锁花色苷溶液吸光值随着时间延长呈逐渐下降趋势。而添加浓度为10 mg/L或20 mg/L的山梨酸钾时，金铁锁花色苷吸光值在5 h内比较稳定。随着山梨酸钾浓度的升高，80 mg/L的山梨酸钾对金铁锁花色苷增色效果最为显著。但高浓度的山梨酸钾(40～80 mg/L)，不仅能快速提高花色苷稳定性，同时也会促进花色苷的降解，只是降解后的花色苷吸光值仍然大于对照组溶液吸光值(如图12所示)。通过对该2种防腐剂进行总体比较发现，在短时间内使用10 mg/L苯甲酸钠或者80 mg/L山梨酸钾均能提高金铁锁花色苷的稳定性。

图11　苯甲酸钠对花色苷稳定性的影响Fig.11　Effect of sodium benzoate on anthocyanin stability

图12　山梨酸钾对花色苷稳定性的影响Fig.12　Effect of potassium sorbate on anthocyanin stability

2.10金属离子对金铁锁花色苷稳定性的影响

K+、Zn2+、Mn2+、Mg2+、Ca2+对维持金铁锁花色苷的稳定性既无促进作用，也不会对花色苷稳定性造成较大破坏。如图13所示，在相同的时间条件下，与对照组相比，K+、Zn2+、Mn2+、Mg2+、Ca2+的添加对金铁锁花色苷溶液吸光值没有较大影响。虽然随着时间的推移，吸光值逐渐降低，但降低幅度小，所以其对花色苷稳定性造成的影响可忽略不计。而Cu2+、Fe3+则对金铁锁花色苷的稳定性有一定的负面影响，其中Fe3+的作用较明显。当在花色苷溶液中加入FeC13时，此时的溶液吸光值明显低于添加其他金属离子时的溶液吸光值，且颜色由红色变为黄色。吸光值减小是因为Fe3+具有氧化性，能加快色素分解成醌式碱。花色苷颜色变化可能是由于加入FeCl3后，溶液发生络合反应，增加Л络合物电子层的激发能。使溶液吸收峰方向转向短波方向，从而改变了花色苷结构，花色苷颜色变成黄色[19]。本试验中添加Cu2+和Fe3+会加快金铁锁花色苷的降解，其中Fe3+的影响较明显，Cu2+相对较弱。这与李伟[20]的研究结果一致，因此，在装载储运金铁锁色素过程中应避免使用铁制或铜制容器。

图13　金属离子对花色苷稳定性的影响Fig.13　Effect of metal ions on anthocyanin stability

3　讨论

本实验参照天然植物花色苷稳定性研究的相关方法[21]，获得粗提率为8.05%的金铁锁花色苷，且发现此花色苷在避光条件下稳定性较好，但耐热性较差。曾有研究报道[16]，花色苷的最大吸光度在光照条件下会有所降低，槟榔红色素对光的稳定性均较差，4 d后测得的吸光值数据下降0.023，所以需避免在光照条件下长时间放置。有学者对多种水溶性色素(甜菜红色素、紫甘薯色素、红米红色素和越橘红色素等)进行研究表明，其中甜菜红稳定性最差。40℃条件下加热处理对色素影响相对比较小，60℃加热时会对花色苷稳定性有一定影响，80℃时稳定性大幅降低[22]。所以花色苷在提取和储存过程中应尽量选择较低的温度和避光保存。这与本研究结果相似：金铁锁花色苷在4～60℃时吸光值的变化大致为先上升后下降，而达到80℃时花色苷分解。所以在提取过程中应降低加热温度来提高金铁锁花色苷的稳定性。酸碱度不同的介质对金铁锁花色苷的稳定性及色泽影响较大，其酸性条件下，pH值越小，花色苷提取液红色越深；在碱性条件下，pH值越大，花色苷提取液蓝色越深。综合考虑，在pH为酸性(pH=2)时，金铁锁花色苷稳定性较好，故该花色苷适用于酸性食品中。王燕[23]对紫色樱桃李和红色樱桃李进行研究，在pH为2或3时，色素吸光值最大；随着吸光值增大(5～8)时，色素吸光值减小；在强碱性溶液中(pH>9)时，色素吸光值又呈现上升趋势。这与本实验中金铁锁花色苷的影响相一致。

氧化剂对花色苷具有一定的分解破坏作用[24]。本实验中H2O2浓度在0.01%时对金铁锁花色苷的吸光值影响不大，但浓度高于0.01%，金铁锁花色苷吸光值降低，花色苷由原来的红色逐渐退至无色，说明其抗氧化能力较弱。陈泽芳[25]研究发现，在红米色素中添加0.025% H2O2对色素稳定性影响较大，且随着难度增加，稳定性越低。抗坏血酸对金铁锁花色苷也有一定的破坏作用，其降解程度受时间影响较大。因为短时间内，不管是高浓度还是低浓度的抗坏血酸均能使吸光值降低，但降低程度相差不大。而随着时间的延长，吸光值急剧降低，且抗坏血酸浓度越高，吸光值越低。据报道，还原剂及常见的一些防腐剂对花色苷会产生增色效应，特别是苯甲酸钠和山梨酸钾；韩林等[16]研究表明，Na2SO3体积分数在1～4.5%时会提高色素的稳定性，且苯甲酸钠和山梨酸钾浓度为2 g/100mL时均能起到增色作用。但也有部分色素的稳定性不受山梨酸钾的影响，如在栀子色素溶液中添加1～5 mg/mL的山梨酸钾不能有效提高色素稳定性[26]。本实验中使用苯甲酸钠和山梨酸钾对金铁锁花色苷的稳定性均有一定的辅助效果，在短时间内使用低浓度的苯甲酸钠(10 mg/L)或高浓度的山梨酸钾(80 mg/L)都有利于提高金铁锁花色苷稳定性。邸翔等[7]研究发现，当加入的还原剂浓度较高时能维持色素的稳定性。

此外，可溶性糖也能维持植物花色苷的稳定性[27]，是因为花色苷的糖苷化作用能保持结构稳定。本实验中蔗糖和葡萄糖对金铁锁花色苷有一定的增色作用，特别是3%的蔗糖和葡萄糖增色效果较为明显。主要机制可能是花色苷的母核表面被一条条流动的糖链缠绕包裹，这种堆积式行为不仅能有效保护花色苷结构不受破坏，还阻碍了水化平衡转换引起的失色，从而保持和提亮原有色泽[28]。Reyes等[29]研究也显示，10%葡萄糖可作为辅色剂提高花色苷的稳定性。但随着反应的进行，高浓度的糖及糖降解物则促进花色苷的热降解[5]，降解速度蔗糖>葡萄糖[15]；一般情况下，多数金属离子对花色苷的稳定性无明显影响，而Cu2+、Fe3+则具有明显的破坏作用，可能是Cu2+、Fe3+使促进了花色苷的氧化[28]。王伟等[30]曾报道，Cu2+、Fe3+会改变白杜果肉黄色素色泽(由橙黄变为浅绿或棕黄色)，破坏色素的结构稳定。但也有研究表明[31]，铜、铁离子对黑花生衣花色苷具有稳定和增色作用，而锰、镁离子在浓度大于2 mmol/L时，有减色作用。

综上，本实验的金铁锁花色苷是一种抗氧化能力较弱的植物天然色素。其在光照及高温条件下均不稳定，所以需低温避光保存。通常添加3%的可溶性糖、0.5%的还原剂和防腐剂(10 mg/L苯甲酸钠和80 mg/L山梨酸钾)对金铁锁花色苷的稳定性起到促进作用，而金属离子铁和铜会破坏其稳定。所以金铁锁花色苷类色素的生产加工应不宜使用含铁或铜的容器盛装。

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Studies on the Stability ofAnthocyanin inPsammosilenetunicoidesCallus

WEIHong-bian,LIXiao-lan,ZHANGMing-sheng*,LIUGui-xian,GAOXiao-feng,XUJia-yu

(College of Life Sciences, Key Laboratory of Plant Resources Conservation and Germplasm Innovation in Mountainous Region (Ministry of Education) , Guizhou University, Guiyang, Guizhou 550025, China)

The anthocyanin was extracted by 1%HCl-ethanol from the red callus ofPsammosilenetunicoides. Effects of temperature, light, pH value, soluble sugar, reductant, oxidant, antiseptic, metalions and other conditions anthocyanin stability was studied. The results showed that anthocyanin was stable at temperature 4～60℃ and acidic condition. Light had strong damage effect for anthocyanin stability, so anthocyanin should be kept away from light. Anthocyanin was greatly affected by the oxidant and Vc, but was well tolerated to reductant. Moreover, the soluble sugar and antiseptic had certain hyperchromic effect for the callus. K+、Zn2+、Mn2+、Mg2+、Ca2+had no great influence, but Cu2+and Fe3+had obvious damage to anthocyanin stability, so the callus or anthocyanin ofP.tunicoidesshould not be stored in copperware and ironware.

Psammosilenetunicoides, Callus, Anthocyanin, Stability

2016-03-10；

2016-04-11

贵州省高层次创新型人才培养计划(黔科合人才[2015]4031号)；贵州省研究生教育创新基地建设(黔教研合CXJD字[2014]001)；贵州大学研究生创新基金(研农2015010)。

张明生(1963-)，男，博士，教授，博士生导师，主要研究方向：植物生物技术与次生物质代谢；E-mail: mszhang@gzu.edu.cn。

TS264.4

A

1008-0457(2016)02-007-08国际DOI编码：10.15958/j.cnki.sdnyswxb.2016.02.002