二氢杨梅素对鲤鱼生长及某些生理指标的影响

秦　湉，李芳香，逯凤肖，郁建平*

(1.贵州大学 生命科学学院，贵州 贵阳，550025；2.贵州大学 药学院，贵州 贵阳 550025)



二氢杨梅素对鲤鱼生长及某些生理指标的影响

秦湉1，李芳香1，逯凤肖2，郁建平2*

(1.贵州大学 生命科学学院，贵州 贵阳，550025；2.贵州大学 药学院，贵州 贵阳 550025)

试验旨在研究二氢杨梅素(Dihydromyricetin ，DMY)对鲤鱼生长性能、血清指标及消化酶指标的影响。选取体重相近的鲤鱼，随机分为5个处理组，Ⅰ组为饲喂基础日粮的对照组，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组为分别添加DMY 0.075%、0.10%、0.125%、0.25%的试验组。试验期为64 d，结果表明，基础日粮中添加0.125%和0.25%的DMY极显著提高鲤鱼的增重率(WGR)和肥满率(CF)，不同剂量的DMY添加都极显著降低鲤鱼饵料系数(FCR)(P<0.01)。基础日粮中添加0.25% DMY显著提高鲤鱼血清中白蛋白(ALB)和总蛋白(TP)的含量(P<0.05)，添加不同剂量的DMY对鲤鱼血清中谷草转氨酶(GOT)活性没有显著影响(P>0.05)。基础日粮中添加0.25% DMY可以显著提高鲤鱼胃蛋白酶活性(P<0.05)，极显著降低肠道淀粉酶活性(P<0.01),添加不同剂量DMY对鲤鱼肠道脂肪酶活性没有显著影响(P>0.05)。

二氢杨梅素；鲤鱼；生长性能；血清指标；消化酶指标

藤茶作为药食两用的植物，是蛇葡萄属植物上的嫩茎叶，最初在民间作为草药应用[1]。二氢杨梅素(Dihydromyricetin ，DMY)是藤茶提取物中的有效成分[2]，研究表明，DMY具有多种药理活性，如消炎、镇痛、抗高血压、保肝护肝及解酒、增强免疫力、抗氧化和抑菌[3-9]，但其在水产生物中还没有广泛应用。近几年，各种中草药以及各种微生物作为鱼饲料添加剂，对鱼类生长性能、抗氧化性等各方面进行研究。试验主要通过在基础日粮中添加不同剂量的DMY，研究DMY对鲤鱼的生长性能、血清指标以及消化酶指标的影响，为DMY在水产生物养殖中的应用提供依据。

1　材料与方法

1.1试验材料

二氢杨梅素：贵州大学生化营养研究所提供。

鲤鱼：贵州本地鲤鱼，购自贵阳市花溪区洛平村渔场。

ALB含量试剂盒(南京建成生物工程研究所)，TP含量试剂盒(南京建成生物工程研究所)，谷草转氨酶试剂盒(南京建成生物工程研究所)，肠道蛋白酶试剂盒(南京建成生物工程研究所)，肠道淀粉酶(南京建成生物工程研究所)，肠道脂肪酶(南京建成生物工程研究所)。

仪器：TU1901双光束紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司)，电子天平(梅特勒；XS205)。

1.2试验设计

选取健康的鲤鱼120尾(30.39±10.53) g，随机分为5个处理，每个处理3个重复，每个重复8尾。以基础日粮组为对照试验组，Ⅰ组为基础日粮组，Ⅱ组为基础日粮组+0.075%DMY，Ⅲ组为基础日粮组+0.10%DMY，Ⅳ组为基础日粮组+0.125%DMY，Ⅴ组为基础日粮组+0.25%DMY。预试验期为14 d，正式试验期为64 d。

表1　基础日粮组成及营养水平(风干%)

注：每千克预混料含：CuSO4·5H2O 2.0 g、FeSO4·7H2O 25 g、MnSO4·4H2O 7 g、ZnSO4·7H2O 22 g、Na2SeO 30.04 g、KI 0.026 g、CoCl2·6H2O 0.1 g、VA 900 000 IU、VD 200 000 IU、VE 4 500 mg、VK 3 220 mg、VB1320 mg、VB21 090 mg、Vpp 2 000 mg、VB6500mg、VB121.6 mg、VC10 000 mg、泛酸 1 000 mg、叶酸 16.5 mg

1.3饲养试验

试验鲤鱼在塑料水箱中饲养(规格为90 cm×50 cm×25 cm)，预实验为14 d。饲喂日常饲料的为对照组，Ⅰ组为日常饲料对照组，Ⅱ组为试验组日常饲料+0.075%DMY，Ⅲ组为试验组日常饲料+0.10%DMY，Ⅳ组为试验组日常饲料+0.125%DMY，Ⅴ组为试验组日常饲料+0.25% DMY。试验期为64 d。每天投喂2次，投饵量为鱼体重的2%～4%，投喂45 min后，将剩余的饵料排出，每2～3 d换一次水，换水后每箱中添加125 g海盐。

1.4指标的测定

1.4.1生长性能指标的测定

正式试验开始后，先测定每箱鱼的初体重，饥饿24 h的状态下记录。试验期为64 d，在试验期间每箱试验鱼在一定的时间段分别检测两次总体重(饥饿24 h)，每组抽取6尾，检测体长和体重，记录。

增重率(weighe gain ratio,WGR,%)=100×(Wt-WO)/WO

饵料系数(feed conversion ration,FCR)=FI/(Wt-WO)

肥满度(condition factor,CF,%)=100×Wb/L3)

式中，Wt：鱼末体均重，WO：鱼初体均重，FI：每尾鱼平均摄食料总量，Wb：每尾鱼末体重，L：每尾鱼末体长)

1.4.2血清指标的测定

每个重复选取6尾试验鱼，尾部静脉采血。在3000 r/min的转速下离心10 min，取得血清。置于1.5 ml离心管中，于-20℃冰箱中保存。以测定血清中白蛋白(ALB)、总蛋白(TP)、谷草转氨酶(GOT)。按试剂盒说明检测鲤鱼血清中白蛋白、总蛋白、谷草转氨酶含量。

1.4.3肠道消化酶的测定

试验每个重复随机选取6尾鱼，进行鱼体解剖。迅速取出肠道，用生理盐水洗净其表面粘液和血液，用滤纸擦干。准确地称取一定量组织，制成组织匀浆，离心取上清液，制成所需粗酶液样品。以测定胃蛋白酶、肠道淀粉酶、肠道脂肪酶。按试剂盒说明检测鲤鱼肠道蛋白酶、肠道淀粉酶、肠道脂肪酶活性。

1.5数据分析

试验的数据采用SPSS 19.0统计处理软件，应用其ANOVA模块进行单因素的方差分析，LSD要点方法对各组间进行多重比较，结果采用平均数±标准差来表示。

2　结果与分析

2.1DMP对鲤鱼生长的影响

可以得出(见表2)，添加DMY剂量为0.125%和0.25%对鲤鱼WGR和CF有极显著的影响(P<0.01)，其WGR幅度分别为153.58%、160.39%，CF增长的幅度分别为40.66%、58.24%。饵料系数各组DMY的添加量都有极显著降低(P<0.01)，其FCR降低幅度分别为52.38%、65.27%、76.09%、77.60%。

表2　DMY对鲤鱼生长性能的影响

注：同一列数据上表字母相同表示差异不显著(P>0.05)，不同小写字母表示差异显著(P<0.05)，不同大写字母表示差异极显著(P<0.05)；下表同。

2.2DMY对鲤鱼血清指标的影响

可以看出(见表3)，添加 DMY 0.25%DMY对鲤鱼血清的ALB、TP含量有显著增高(P<0.05)，其ALB增高幅度为25.78%，TP增高幅度为22.55%(P<0.05)，其他各组间差异性不显著(P>0.05)。添加不同剂量DMY对鲤鱼血清中GOT含量没有显著影响(P>0.05)。

表3　DMY对鲤鱼血清指标的影响

2.3DMY对鲤鱼肠道消化酶指标的影响

可以看出(见表4)，添加0.25%DMY对鲤鱼的肠道淀粉酶活性可以显著降低(P<0.05)，其降低幅度为77.41%，其他各组间差异性不显著(P>0.05)；添加0.25%DMY可以极显著提高肠道蛋白酶活性(P<0.01)，其增高幅度为181.82%，其他各组间差异性不显著(P>0.05)；添加不同剂量DMY对鲤鱼肠道脂肪酶活性没有显著影响(P>0.05)。

表4　DMY对鲤鱼肠道消化酶指标的影响

3　结论与讨论

3.1基础日粮中添加不同剂量DMY对鲤鱼生长性能的影响

WGR和CF的变化是饲料添加剂对鲤鱼生长性能影响最直接的表现，吴文等[10]在饲料中添加0.3%的绞股兰来饲喂草鱼，使其增重提高31.25%。戴青[11]在日粮中添加0.25%DMY可以极显著提高瑶山鸡的日增重。柴桂珍[12]在饲料中草药添加可以促进鱼类的生长。黄银燕[13]在饲料中添加2%和4%的螺旋藻及杜仲提取物可以显著降低奥尼鱼饵料系数。本试验结果，日粮中添加剂量为0.125%和0.25%的DMY对鲤鱼WGR和CF都有极显著提高(P<0.01)，添加不同剂量的DMY都可以极显著降低其FCR(P<0.01)。结果表明，添加不同剂量的DMY对鲤鱼的生长性能有一定的促进作用。

3.2基础日粮中添加不同剂量的DMY对鲤鱼血清指标的影响

血清中ALB和TP含量可以表现体内蛋白代谢的情况，其中ALB参与鱼体免疫调理和营养的作用，血清中GOT的含量是肝功能的重要指标，在机体的蛋白质代谢中有重要作用。杨弘等[14]研究表明饲料蛋白水平对尼罗罗非鱼ALB和TP没有显著影响，但是与对照组相比，数值有明显增长。聂国兴[15]木聚糖酶对尼罗罗非鱼血液中ALB和TP含量有极显著提高，对血液中GOT含量没有显著影响。夏薇等[16]三种不同饲料添加剂对建鲤血清中GOT的活性没有显著影响，虽然数值有明显降低。Wang Y等[17]在基础日粮中用蛋白肽代替部分蛋白原料，建鲤鱼血清中GOT的活性偏低在正常情况下，当肝脏和心机等组织发生病变时，血清中GOT活性会大幅度上升。周小波等[18]在基础日粮中添加不同乳酸菌对血清中GOT活性有降低作用。本试验在基础日粮中添加0.25%的DMY可以显著提高血清中ALP和TP的含量(P<0.05)，饲料中添加DMY可以提高鲤鱼体内蛋白质的代谢，对鲤鱼鱼体的营养水平有显著的提高。添加不同剂量的DMY对鲤鱼血清中GOT活性没有显著影响(P>0.05)，DMY对于鲤鱼的肝脏功能有保护作用。

3.3基础日粮中添加不同剂量的DMY对鲤鱼肠道消化酶指标的影响

张耀武等[19]在黄颡鱼的日粮中添加含有金银花的中草药，可提高其生长性能和非特异性免疫力。许培玉[20]在凡纳滨对虾中添加小肽制品可提高肠道消化酶的活性。本试验，在基础日粮中添加DMY 0.25%可以显著增强鲤鱼胃蛋白酶活性(P<0.05)，极显著降低肠道淀粉酶活性(P<0.01)，在基础日粮中添加不同剂量DMY对鲤鱼肠道脂肪酶活性没有显著影响(P>0.05)，但可以在一定程度上降低肠道脂肪酶活性。

[1]侯建军,覃红斌,胡泽华. 野生藤茶的药理作用和临床应用研究进展[J]. 湖北民族学院学报(医学版),2002,19(4):36-38.

[2]熊璞,姚茂君,肖凯军. 藤茶中二氢杨梅素的提取研究[J]. 现代食品科学,2009,25(8):907-910.

[3]何桂霞,杨伟朋,裴刚,等. 二氢杨梅素抗脂质过氧化作用的研究[J]. 中国中药杂志,2003,28(12):1188-1190.

[4]杨书珍,张友胜,宁正祥,等. 二氢杨梅素对几种食品常见菌的抑制效果[J]. 天然产物研究与开发,2003,15(1):40-42.

[5]潘人琦,郁建平. 二氢杨梅素解酒作用的研究[J]. 山地农业生物学报,2012,31(3):247-249.

[6]Matsumoto T，Tahara S. Ampelopsin，a major antifungal constituent from salix sachalinensis and its methyl ethers. Nippon nogeikagaku kaishi [J]. Joumal of the Japan Society for Bioseience Biotechnology and Agrochemistry, 2001,75(6):659-667.

[7]覃洁萍,钟正贤,周桂芬,等. 双氢杨梅树皮素降血糖的试验研究[J]. 中国中药杂志,2001,18(5):351-353.

[8]张友胜,宁正祥,杨书珍,等. 显齿蛇葡萄蛇二氢杨梅树皮素的抗氧化作用及其机制[J]. 药学学报,2003,389(4):241-244.

[9]王丹,郁建平，刘灏. 藤茶二氢杨梅素抗氧化活性研究[J]. 山地农业生物学报,2013,32(3):243-246.

[10]吴文,叶金云,陆清尔,等. 绞股兰作为饲料添加剂的探究[J]. 上海水产大学学报,1998,7(8):367-370.

[11]戴青,郁建平,龚飞，等. 二氢杨梅素对瑶山鸡生长,涂在性能及血清抗氧化指标的影响[J]. 饲料工业杂志社,2014,35(16):9-12.

[12]柴桂珍,刘冠章,赵晶晶，等. 中药在水产养殖中应用前景[J]. 中国兽药杂志,1999,33(2):52-54.

[13]黄银燕,刘华忠. 螺旋藻对彭泽鲫生长性能的研究[J]. 齐鲁渔业,2005,22(4):39-40.

[14]杨弘,徐起群,乐贻荣,等. 饲料蛋白水平对尼罗罗非鱼幼鱼生长性能,体组成,血液学指标与肝脏非特异性免疫指标的影响[J]. 动物营养学报,2012,24(12):2384-2392.

[15]聂国兴,明红,郑俊林,等. 木聚糖酶对尼罗罗非鱼血液生理生化指标的影响[J]. 大连水产学院学报,2009,22(5):361-365.

[16]夏薇. 几种环保型饲料添加剂对建鲤生产性能和生化指标的影响[D].南京：南京农业大学,2014.

[17]Wang Y,Xiong L,Yang K J,et al. Effect of beta-cypermethrin on GTP and GOT activities of crucian serum[J]. Agric Sci&Technol,2005,6(1):20-23.

[18]周晓波,黄燕华,曹俊明,等. 对罗非鱼生长性能、体成分、血清生化指标及肠道菌群的影响[J]. 2014,26(7):2009～2017.

[19]张耀武,郑建武,刘文辉,等. 复方中草药制剂对黄颡鱼生长和非特异性免疫功能的影响[J]. 水产科学,2010,29(4):226-228.

[20]许培玉,周洪琪. 小肽制品对凡纳滨对虾蛋白酶和淀粉酶活力的影响[J]. 上海水产大学学报,2005(2):133-137.

Effects of Dihydromyricetin on Growth Performance, Serum Indexes and Digestive Enzyme Indexes of Common Carp

QINtian1,YUJian-ping2,LUFeng-xiao3,LIFang-xiang3

(CollegeofLifeSciences,GuizhouUniversity,Guiyang,Guizhou550025，China)

The effects of Dihydromyricetin (DMY)on growth performance,serum indexes anddigestive enzymes ofCyprinuscarpiowere investigated in the present work.The group fed the basal diet was used as the control, and the basal diets supplemented with different DMYs (0.075%,0.10%,0.125% and 0.25%) were used as the treatments.The treatments added with 0.125% and 0.25% DMY significantly increased WGR and CF ofCyprinuscarpio(P<0.01),and different dosages of DMY might extremely significantly decrease the CFR(P<0.01). Addition of 0.25% DMY significantly increased ALB and TP levels in the serum ofCyprinuscarpio(P<0.05) ,and different dosages of DMYs gave no significant effect on the GOT activity in the serum (P>0.05). Treatment with 0.25% DMY could significantly improvethe pepsaseactivity (P<0.05),intestinalamylase activitydecreased significantly(P<0.01),and the addition of different dosages of DMYs had no significantly effects on the intestinal lipase activity ofCyprinuscarpio(P>0.05).

Dihydromyricetin;Cyprinuscarpio; Growth performance; Serum indexes; Digestive enzyme

2016-01-29；

2016-02-07

贵州省科技厅农业攻关项目[黔科合MY〔2011〕3094号]。

郁建平，男，教授，博士生导师，主要研究方向：天然产物的分离、提取；E-mall: yujp666666@163.com。

S963.73

A

1008-0457(2016)01-0091-04国际DOI编码：10.15958/j.cnki.sdnyswxb.2016.02.018