治伤散的薄层色谱鉴别

陈晓燕，陈卫红

(1.长沙市第三医院，湖南 长沙 410015;2.湖南中医药大学第二附属医院，湖南 长沙 410005)

治伤散是由土鳖虫、丹参、黄柏、冰片等13味中药制成的制剂，具有活血祛淤、消肿止痛等功效，用于跌打损伤、淤血肿痛、软组织损伤、闭合性骨折经手法复位后的辅助治疗。为了控制该制剂质量，保证临床用药安全，本文采用薄层层析法对该制剂中丹参、冰片及黄柏进行了鉴别，方法简便可靠，可用于该制剂的定性鉴别。

1 试药与仪器

1.1 仪器 PEPROSTAR3紫外检测仪(岛津，日本);KQ－300DE超声清洗器(常州诺基仪器有限公司，常州);电子天平(Startorius，德国)。

1.2 试药 丹参酮ⅡA对照品(批号:110766－200417，供鉴别用);丹参对照药材(批号:120923－200610，供鉴别用);冰片对照品(批号:0743－8902，供鉴别用);黄柏对照药材(批号:0937－200004，供含量测定用);盐酸小檗碱对照品(批号:110713－200910，供含量测定用)，以上对照药材及对照品均由中国药品生物制品检定所提供;硅胶G(青岛海洋化工厂，薄层色谱用);其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 丹参的薄层鉴别

2.1.1 供试品溶液的制备［1～3］取本品 10g，加乙醚 40mL，振摇提取10min，滤过，滤液蒸干，残渣加乙酸乙酯1mL使溶解，作为供试品溶液。

2.1.2 对照药材溶液的制备 取丹参对照药材1 g，同法制成对照药材溶液。

2.1.3 阴性对照药材溶液的制备 按处方称取缺丹参的其他药材，制成缺丹参的阴性对照样品，同法制备缺丹参的阴性对照溶液。

2.1.4 对照品溶液的制备 取丹参酮ⅡA对照品，加甲醇制成每1mL含2mg的溶液，作为对照品溶液。

2.1.5 鉴别方法 照薄层色谱法(《中国药典》2010年版一部附录ⅥB)试验，吸取上述供试品溶液、阴性对照溶液与对照药材溶液各7μL、对照品溶液各5μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(30～60℃)－乙酸乙酯(18∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%三氯化铁乙醇溶液，置日光下检视。供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，缺丹参的阴性对照无干扰(见图1)。

2.2 冰片的薄层鉴别

2.2.1 供试品溶液的制备 取本品0.5 g，加乙酸乙酯5mL，超声处理10min，滤过，滤液作为供试品溶液。

图1 丹参的薄层鉴别图谱

2.2.2 对照品溶液的制备 取冰片对照品，加乙酸乙酯制成每1mL含1mg的溶液，作为对照品溶液。

2.2.3 阴性对照药材溶液的制备 按处方称取缺冰片的其他药材，制成缺冰片的阴性对照样品，同法制成缺冰片的阴性对照溶液。

2.2.4 鉴别方法 照薄层色谱法(《中国药典》2010年版一部附录ⅥB)试验，吸取上述三种溶液各4μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯－丙酮(9∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，缺冰片的阴性对照无干扰(见图2)。

图2 冰片的薄层鉴别图谱

2.3 黄柏的薄层鉴别

2.3.1 供试品溶液的制备 取本品1.5 g，加甲醇10mL，振摇提取10min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇5mL使溶解，作为供试品溶液。

2.3.2 对照药材溶液的制备 取黄柏对照药材0.1 g，同法制成对照药材溶液。

2.3.3 对照品溶液的制备 取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每毫升含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。

2.3.4 阴性对照药材溶液的制备 按处方称取缺黄柏的其他药材，制成缺黄柏的阴性对照样品，同法制成缺黄柏阴性对照溶液。

2.3.5 鉴别方法 照薄层色谱法(《中国药典》2010年版一部附录ⅥB)试验，吸取上述供试品溶液及阴性对照溶液各2μL、对照药材及对照品溶液各1μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯－乙酸乙酯－异丙醇－甲醇－水(6∶3∶2∶1.5∶0.3)为展开剂(置双槽展开缸中，另一槽加等体积的浓氨试液，预平衡15min)，展开，取出，晾干，置紫外灯(365 nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品及对照药材色谱相应的位置上显相同颜色的荧光斑点，阴性无干扰(图3)。

图3 黄柏的薄层鉴别图谱

3 讨论

3.1 丹参中含有菲醌类化合物:如丹参酮Ⅰ(TanshinoneⅠ)、丹参酮ⅡA(TanshinoneⅡA)、丹参酮ⅢB(TanshinoneⅢB)、隐丹参酮(Cryptotanshinone)等;合成冰片主要含龙脑(Borneol)59.78% ～58.93%，异龙脑(Isobornrol)38.98% ～37.52%;黄柏含有小檗碱等生物碱类成分［4～7］。根据各药味的成分，设计薄层色谱鉴别方法，结果表明方法可行。

3.2 在规定的薄层色谱条件下，对丹参、冰片、黄柏的薄层色谱鉴别方法分别进行了温、湿度条件的影响试验，结果薄层色谱均斑点清晰，分离度好，表明温湿度条件对薄层色谱鉴别效果影响可忽略。

3.3 此外对治伤散中其他药材如大黄、白芍、西红花等的薄层鉴别方法进行了研究，因薄层色谱效果不理想，暂未列入质量标准。

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