蒲苓盆炎康颗粒丹参酮ⅡA的含量测定方法研究

全金栋，王言玉

(山东翔宇健康制药有限公司，山东 临沂 276023)

慢性盆腔炎为妇科常见病、多发病，病情顽固，容易反复发作，严重危害广大妇女的健康。我公司借助传统中医理论，经多年研究和理论探索，成功研制了蒲苓盆炎康颗粒。作为纯中药制剂，蒲苓盆炎康颗粒为中医治疗慢性盆腔炎提供了一个新的、较为理想的治疗药物。该药为中药复方制剂，其组方由土茯苓、丹参、夏枯草、蒲公英、车前子、粉萆薢、杜仲、三七、川芎等组成，其中丹参、川芎、杜仲、三七和车前子中含有脂溶性的成分。为了充分发挥药物的作用，在制备工艺上先用乙醇对上述五种药材进行处理;然后将醇提取后的药渣与其余的药材合并，用水煎煮。这两种工艺虽然可以更有效地提取有效成分，但对如何测定其有效成分的含量，造成了一定影响，为此，我们参考大量有关文献，通过多次测定试验，建立了测定该品种含量的有效方法，为有效控制蒲苓盆炎康颗粒中有效成分的含量提供了技术保障。

1 仪器与样品

1.1 仪器 高效液相色谱仪，岛津，SPD－10Avp紫外检测器，LC－10Atvp。

1.2 试药 蒲苓盆炎康颗粒(批号:100101，100102，100103;生产厂家:山东翔宇健康制药有限公司)，丹参酮ⅡA(批号110766－200518，中国药品生物制品检定所)。

2 方法与结果

2.1 色谱条件 填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶;以甲醇－水(75∶25)为流动相;检测波长为270 nm。理论板数按丹参酮ⅡA峰计算应不低于2000。

2.2 对照品溶液的制备 取丹参酮ⅡA对照品适量，精密称定，置棕色量瓶中，加甲醇制成每1 mL含丹参酮ⅡA 16 μg的溶液，即得。

2.3 供试品溶液的制备 取本品粉末(过三号筛)约0.3 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50 mL，称定重量，加热回流1 h，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.4 测定 精密吸取对照品溶液、供试品溶液各5 μL，注入液相色谱仪，照高效液相色谱法(《中国药典》2010版一部附录Ⅵ D)［1］测定，即得。

2.5 空白实验 以丹参酮ⅡA对照品、含丹参样品及缺丹参的空白样品分别进柱，缺丹参的空白样品在丹参酮ⅡA位置上无干扰峰，见图1，2。

图1 丹参酮ⅡA对照品HPLC图谱

图2 含丹参样品HPLC图谱

图3 缺丹参空白样品HPLC图谱

2.6 线性关系考察 分别精密吸取含丹参酮ⅡA 0.02988 μg，0.05976 μg，0.08964 μg，0.1195 μg，0.1494 μg，0.1793 μg，0.2092 μg，0.2390 μg 的对照品溶液注入液相色谱仪，测定峰面积。结果以峰面积为纵坐标，进样量(μg)为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程:Y=342939X－756，r=0.9997。结果表明丹参酮ⅡA 在 0.02988 ～0.2390 μg范围内线性关系良好，结果见表1。

表1 丹参酮Ⅱa线性关系考察

2.7 精密度和重现性试验 精密吸取同一供试品溶液，重复进样5次，结果RSD=1.0%，表明本方法精密度良好。

取同一批号样品，精密称样5份，同法测定，结果RSD=1.3%，表明本方法重现性良好。

2.8 稳定性试验 取同一份供试品溶液，放置在一定条件(温度在25±2℃、相对湿度60% ±10%)下，每隔一段时间取样测定供试品溶液含量，结果RSD=1.1%，表明供试品溶液在24 h内基本稳定。

2.9 回收率试验 样品研细，取约0.3 g(含丹参酮ⅡA 0.1363 mg·g－1)，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50 mL，加入对照品0.0747 mg(丹参酮ⅡA甲醇溶液0.01494 mg·mL－1，精密吸取5 mL，加至样品溶液中)，称定重量，加热回流1 h，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。结果如表2。

表2 回收率试验结果

2.10 样品含量测定 对3批样品及样品1分别测定丹参酮ⅡA，结果如表3。

表3 样品含量测定结果

3 讨论

蒲苓盆炎康颗粒由9味药材组成，其中土茯苓为君药，丹参为臣药，由于土茯苓的有效成分不明确，因此选择臣药丹参中丹参酮ⅡA为含量测定指标。药典中丹参药材的丹参酮ⅡA的测定是用 HPLC法，流动相是用甲醇 －水(75∶25)，因此本研究参照药典方法采用HPLC法测定蒲苓盆炎康颗粒中丹参酮ⅡA的含量。实验结果表明，该法操作简便，专属性强、线性、精密度、重现性好，回收率、稳定性良好，测定值基本无明显的改变，由此可以确定，用HPLC法测定蒲苓盆炎康颗粒中的丹参酮ⅡA含量，不失为控制该制剂质量的有效方法。

［1］国家药典委员会.中华人民共和国药典2010年版(一部)［S］.北京:中国医药科技出版社，2010:70－71.