2 型糖尿病及并发症患者相关细胞检测的意义

周洁 马莉 杨梅 杨春英 夏志鸿 张航

(贵阳中医学院附属医院，贵州 贵阳 550002)



2 型糖尿病及并发症患者相关细胞检测的意义

周洁 马莉 杨梅 杨春英 夏志鸿 张航

(贵阳中医学院附属医院，贵州 贵阳 550002)

目的 探讨CD4+CD25+HighTreg细胞及T淋巴细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+)在2型糖尿病(T2DM)及并发症患者中的变化。方法 用流式细胞术(flow cyt0metry,FCM)对80例T2DM病患者(其中无并发症T2DM患者40例，有并发症的T2DM患者40例)。和同期的40例健康体检人群的外周血T淋巴细胞亚群进行检测和统计比较。结果 显示2型糖尿病有并发症患者外周血CD3+、CD4+、CD4+CD25+HighTreg细胞、CD4+/CD8+比值显著低于无并发症组和健康对照组差异有统计学意义(P<0.05)，CD8+细胞显著高于无并发症组和对照组差异有统计学意义(P<0.05)。结论 CD4+CD25+HighTreg细胞及T淋巴细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+)参与了2型糖尿病的发生发展，检测这些细胞有助于2型糖尿病及其并发症的诊治。

2型糖尿病； 并发症； CD4+CD25+HighTreg细胞； 免疫功能

2型糖尿病(T2DM)占糖尿病患者90%以上，发生和发展是多因素的、复杂的病理过程，免疫系统在疾病的发生、发展中可能起作用[1-2]。由于疾病病因及长期慢性的特点，免疫状态受到很大影响，并且其并发症越来越多，许多并发症(例如肾病和失明)的发病机制可能涉及很多方面，具体机制尚未完全明了，免疫机制可能参与其中[3]。有资料显示糖尿病合并感染的患者也存在T淋巴细胞亚群的改变，T淋巴细胞可以通过分泌细胞因子参与糖尿病的发生和病变的发展。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2014年1月至2015年1月在贵阳中医学院第二附属医院进行治疗的确诊为T2DM病人80例，T2DM患者及并发症患者均符合2010年ADA修订的诊断标准[5]。其中无并发症T2DM患者40例，男28例，女12例，年龄40～70岁。有并发症[6]的T2DM患者40例，男25例，女15例，年龄42～73岁,(其中糖尿病肾病12例、糖尿病眼病11例、糖尿病足10例、糖尿病神经病变7例)。全部既往无免疫相关性疾病，无HIV感染，无病毒性肝炎，无免疫抑制药物治疗史。健康组选择同期在贵阳中医学院第二附属医院体检中心健康体检者40例，男20例，女20例，年龄35～70岁。无HIV感染，无病毒性肝炎，无免疫抑制药物治疗史，血压、心电图、血生化等均正常。患者组与健康组比较性别、年龄差异无统计学意义(P>0.05)。

1.2 检测方法 (1)仪器与试剂：采用美国贝克曼公司Epics XL流式细胞仪对受检者外周血CD4+CD25+HighTreg细胞和T淋巴细胞亚群进行检测,试剂盒采用美国贝克曼公司T淋巴细胞亚群4色分析试剂和Foxp3-PE-Cy5试剂。

1.3 统计学方法 采用SPSS 18.0统计软件进行统计学处理，t检验进行数据处理。

2 结 果

2型糖尿病患者外周血CD4+CD25+HighTreg细胞CD3+、CD4+细胞及CD4+/CD8+比值，无并发症组和有并发症组均明显低于健康组差异有统计学意义(P<0.01)，有并发症组明显低于无并发症组差异有统计学意义(P<0.01);CD8+细胞无并发症组和有并发症组均明显高于健康差异有统计学意义(P<0.01)有并发症组明显高于无并发症组差异有统计学意义(P<0.01)。见表1。

组别nCD4+CD25+HighTregCD3+ CD4+ CD8+ CD4+/CD8+ 健康对照4011.21±2.1563.23±6.7937.71±6.1122.25±4.57 1.62±0.39无并发症组409.89±2.11*56.41±7.32*34.68±6.2*26.68±4.89* 1.31±0.28*有并发症组407.75±2.05*△51.96±7.02*△31.26±5.58*△29.83±4.86*△ 1.11±0.27*△

注：与健康对照组比较,*P<0.01；与无并发症组比较,△P<0.01。

3 讨 论

本研究结果显示，T2DM患者的CD4+CD25+HighTreg细胞数量降低，较健康对照组有统计学意义，有并发症组较无并发症降低，也有统计学意义。CD4+CD25+HighTreg的降低对CD8+T细胞毒性的抑制作用减低，胰岛内CD8+T细胞分化为细胞毒性淋巴细胞(CTLs)[7]，破坏细胞免疫功能，对细菌病毒的抵抗力下降，加速了糖尿病的发展，易诱发各种并发症[8]。并发症的发生又加重了免疫功能的缺陷，导致CD4+CD25+HighTreg细胞进一步减少。

CD3测定结果代表成熟总T淋巴细胞水平。CD3下降表示成熟T淋巴细胞减少，细胞免疫功能下降。CD4+和CD8+是成熟T淋巴细胞不同亚群的表面标志，在呼吸道病毒感染的患者中，CD4+T细胞起辅助作用，CD8+T细胞主要通过释放穿孔素和颗粒酶杀伤靶细胞而清除病原体[9]。本研究显示，T2DM患者有并发症组CD3+、CD4+、细胞、CD4+/CD8+比率较无并发症组和健康对照组明显降低；CD8+细胞有并发症组较无并发症组合健康对照组明显升高。高血糖亦可使机体免疫稳定性遭到破坏，2型糖尿病患者CD3+、CD4+T细胞的下降可能是其易感染的原因，T细胞对有丝分裂原反应减弱，粒细胞的趋化性、吞噬及杀菌能力减低，使机体的免疫功能下降，易引发各种并发症，并发症的发生又加重破坏细胞免疫平衡，使得T淋巴细胞亚群的变化更为显著。CD4+CD25+HighTreg细胞和T淋巴细胞亚群参与了T2DM病情的发生发展[10]，甚至是并发症的发生。所以CD4+CD25+HighTreg细胞和T淋巴细胞亚群可以作为监测T2DM发生并发症的良好指标，CD8+升高易引起感染，这也是监测并发症发生的良好指标。而CD4+CD25+HighTreg和CD4+/CD8+在T2DM发生并发症后变化显著，对T2DM发展和预后提供了很好的监测指标。

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