HIV-1/2抗体唾液快速检测试剂在贵阳市MSM人群中的应用及评价

马黎婷 袁飞 周健 佘敏 石作宏△ 洪峰

(1.贵州医科大学公共卫生学院，贵州 贵阳 550025；2.贵阳市疾病预防控制中心，贵州 贵阳 550003)

HIV-1/2抗体唾液快速检测试剂在贵阳市MSM人群中的应用及评价

马黎婷1袁飞2周健2佘敏2石作宏2△洪峰1

(1.贵州医科大学公共卫生学院，贵州 贵阳 550025；2.贵阳市疾病预防控制中心，贵州 贵阳 550003)

艾滋病病毒Ⅰ/Ⅱ型抗体； 唾液； 快速检测试剂； MSM

自1981年在美国旧金山的男男性接触人群(men who have sex with men，MSM)中发现5例艾滋病(acquired immunodeficiency syndrome, AIDS)病人以来[1]，全世界每天有超过7000例新感染病例并且遍布世界各地[2]。其中MSM是感染人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus，HIV)的高危人群。经性传播是我国艾滋病最为主要的传播途径，而且男男同性性传播增加明显，MSM传播HIV所占比例从2006年的2.5%增加到2013年的21.4%，已成为我国艾滋病病毒HIV感染率上升最快的人群之一[3]。因此，在MSM人群AIDS/HIV监测中，采用快速HIV抗体检测试剂提高MSM人群的HIV感染检出率，扩大干预人数，是控制HIV在MSM人群中蔓延传播的关键。本研究以MSM人群唾液为检测标本，对HIV-1/2抗体唾液快速检测试剂进行灵敏度和特异度的比较研究，进一步验证唾液检测试剂的准确性，为唾液试剂在人群HIV1/2抗体筛查中的推广应用提供依据。

1 对象与方法

1.1 研究对象

采用滚雪球抽样方法，选择134名未知自己HIV感染状况的自愿咨询检测HIV的MSM为研究对象，同时平行采集口腔黏膜渗出液和血液标本；根据国家2009年版《全国艾滋病检测技术规范》标准评判其HIV感染状况。所有研究对象在其知情同意后入选，不设排除标准。

1.1.1 口腔黏膜渗出液的采集 用试剂袋中口腔拭子的布垫端沿受试者上牙龈线慢慢来回擦拭，用时5～6 s，再用布垫端的另一面擦拭下牙龈线，用时5～6 s，立即将口腔拭子的布垫插入试剂袋内装有稀释液的试管中，让布垫两面紧贴试管壁，上下刮擦6～8次，完成取样。口腔黏膜渗出液样本进行现场检测并判读结果，不予保存。

1.1.2 血液采集 用加有EDTA-K2抗凝剂的真空采血管抽取3～5 mL静脉血，轻轻颠倒混匀3～4次，将采集的抗凝全血1500 r/min 离心15 min，吸出上层血浆20℃保存待检。

1.2 检测方法

1.2.1 唾液标本快速检测 唾液样本使用人类免疫缺陷病毒抗体口腔粘膜渗出液检测试剂盒(北京玛诺生物制药有限公司生产)进行检测(胶体金法)，批号20130302，按其使用说明书进行操作和结果判定。

1.2.2 血液标本检测 血液样本使用人类免疫缺陷病毒抗体(HIV1/2)检测试剂(广州万孚生物技术股份有限公司及Standard Diagnostics Inc生产)进行初筛检测(胶体金法)，批号20140528、20140415，按其使用说明书进行操作。如果初筛检测结果为阳性，则需要使用不同厂家生产的不同试剂进行第二次初筛检测，最后使用确证试剂进行确证检测。

1.2.3 确证检测 血液样本使用人类免疫缺陷病毒(HIV1/2型)抗体检测试剂盒(MP生物医学亚太私人有限公司生产)进行HIV初筛检验呈阳性结果的血清样本的确证检测(免疫印迹法)，批号20120929，按其使用说明书进行操作。

1.3 结果对比

唾液检测结果和血液检测结果作对比，评价唾液检测试剂的灵敏度和特异度。灵敏度=真阳性/(真阳性+假阴性)×100%；特异度=真阴性/(真阴性+假阳性)×100%。

2 结 果

2.1 两种检测试剂结果对比

唾液检测试剂和血液检测试剂共检测样本134份，唾液检出阳性49份，血液检出阳性48份，唾液检测阴性85份，血液检出阴性86份。见表1。

表1 唾液试剂和血液试剂试验结果对比(n=134)

2.2 两种检测试剂确证结果对比

见表2。

表2 唾液与血液试剂确证结果对比(n=134)

2.3 唾液检测试剂的评估结果

由表1和表2可以得出本次唾液检测试剂的灵敏度为97.9%(47/48)，特异度为97.7%(84/86)，由灵敏度和特异度可以计算出唾液检测试剂检测的正确率为95.6%(97.9%+97.7%-100%)。

2.4 唾液检测试剂和血液检测试剂相关特性比较

对比唾液检测试剂和血液检测试剂的特性显示，唾液和血液初筛试剂的共同点是都可以在室温下进行操作，都可以通过肉眼判读结果；不同点在于唾液试剂不需要采血，也不需要特殊的实验室和仪器；免疫印迹法确证试剂操作比初筛试剂还要复杂，需要特殊的实验室和判读结果仪器，初筛实验需要使用酶标仪、洗板机及规范的初筛实验实，免疫印迹法需要具备规范的确证实验室。

3 讨 论

近年来，中国大中城市MSM 人群规模和AIDS疫情呈现日趋上升趋势，贵阳、重庆、成都、昆明等西南主要城市MSM人群HIV感染率在10%以上，高于全国平均水平[4]。本研究调查134名MSM，HIV感染检出率高达35.8%，由于AIDS的不可治愈，预防控制HIV传播是减少AIDS对健康危害的唯一措施，早检测、早发现、早治疗是预防控制HIV传播的有效措施之一。

传统的HIV抗体检测试剂都是检测血液样本，这类试剂必须在规定场所(如艾滋病筛查/确证实验室)中使用，而且采集血液具有损伤性，对医务人员等存在职业暴露的潜在危害，检测结果等待时间长，不适于对可疑人群实施规模化的普查和筛查，所以，在长期实践中，人们日益认识到理想中的HIV检测方法应该具有无损伤性、安全性、灵敏性等特点[5]。随着HIV抗体检测试剂的发展，2004年美国FDA批准了Ora Quick公司生产的唾液HIV快速检测试剂盒，2006年我国企业生产的以尿液和唾液作为标本进行艾滋病快速检测的试剂也已面市，国家2009年版《全国艾滋病检测技术规范》已将唾液HIV-1/2抗体检测列入，但该试剂目前在国内还没有广泛地应用到人群中，一方面可能是由于唾液检测试剂价格偏高(该检测属于自愿支付)，另一方面HIV感染高危人群如MSM对唾液检测试剂结果还存在不信任态度[6]。本研究结果表明，与血液试剂检测结果比较，唾液试剂灵敏度为97.9%，特异度为97.7%，和其他研究者的结果有一定差异，可能的原因一是本研究样本量较小，虽然只有2例假阳性，1例假阴性，但对灵敏度和特异度的计算影响较大，二是本研究检测出的49例阳性中有2例假阳性在试纸上显示弱阳性，检测区的指示线为淡红色，为防止漏检阳性将其判读为阳性，在一定程度上间接影响了灵敏度和特异度。综合本研究结果与相关文献报道，可以认为唾液检测试剂是一种比较可靠的HIV快速检测试剂。

由于唾液检测试剂具有无创、快速、无需特殊检测场所、无需特殊检测仪器、剩余样本不必按生物危害样本处理等优点，尤其适用于非血源性的个人检测如老人、小孩、吸毒者等难于采集血样的人群以及不必抽血检测的人群的现场检测，当唾液HIV抗体快速检测试剂可以进入到家庭、娱乐场所、特殊高危人群等部分公共场所和个人生活环境时，可以更好地推进HIV预防工作开展，扩大HIV检测覆盖面，及时发现潜在的感染者。在扩大艾滋病检测可及性的政策背景下，HIV快速检测方法必将受到更多的关注。

[1] 刘杨, 黄薇, 孟建彤, 等.一种口腔渗出液中HIV抗体检测试剂的 实验研究[J].中国卫生检验杂志, 2012,2(7):1576-1577.

[2] 姜凤云.艾滋病的流行趋势及预防控制策略[J].中国医药指南，2012,10(34):470-471.

[3] 中国疾病预防控制中心. 2014年7月全国艾滋病性病疫情及主要防治工作进展[J]. 中国艾滋病性病,2014, 20(9):629.

[4] 张国磊, 姜影, 梁欣，等.HIV唾液快速检测在公园场所MSM 人群中的应用[J].中国艾滋病性病,2013,19(4):261-263.

[5] 李晓娜, 郑吉龙, 关一夫. 唾液中HIV抗体快速检测诊断胶体金免疫层析试纸条的研制[J]. 辽宁师范大学学报, 2013,36(2):250-254.

[6] 许瑜楠，齐啸，李东亮，等. 北京市男男性行为者HIV唾液快检支付意愿调查[J]. 中国公共卫生,2013, 29(12):1721-1725.

R512.91；R446.62

B

1000-744X(2016)02-0204-03

2015-05-20)

△通信作者，E-mail：18985576001@189.cn