氟化钠抗凝管离心前、后放置时间对血糖测定值的影响

王　路，　刘　旻，　徐　承，　孙雪娇，　刘　畅，　程　江

(石河子大学医学院第一附属医院检验科，新疆 石河子 832000)

氟化钠抗凝管离心前、后放置时间对血糖测定值的影响

王路1，刘旻，徐承，孙雪娇，刘畅，程江

(石河子大学医学院第一附属医院检验科，新疆 石河子 832000)

摘要：目的探讨氟化钠抗凝管离心前、后放置时间对血浆葡萄糖(简称血糖)测定值的影响。方法将同一份血液标本置于5支肝素钠-氟化钠管和5支酸化氟化钠管中，血液标本随机分为两组，一组分别于即刻、0.5、1、2、4 h离心后再检测血糖浓度；另一组立即离心，分别于即刻及放置0.5、1、2、4 h后检测血糖浓度。结果肝素钠-氟化钠管和酸化氟化钠管离心前放置0.5、1、2、4 h的血糖测定值与即刻测定值比较差异均有统计学意义(P<0.05)，且2种抗凝管之间差异亦有统计学意义(P<0.05)；肝素钠-氟化钠管和酸化氟化钠管及时离心后放置0.5、1、2、4 h的血糖测定值与即刻测定值比较差异均无统计学意义(P>0.05)，且2种抗凝管之间差异亦无统计学意义(P>0.05)。离心前、后肝素钠-氟化钠管和酸化氟化钠管血浆葡萄糖测定值的差值差异有统计学意义(P<0.05)。结论氟化钠抗凝管如及时离心，血浆葡萄糖浓度可稳定4 h。若不能及时离心，肝素钠-氟化钠管血糖浓度将在4 h内降低，而酸化氟化钠管能稳定4 h。因此，为了立即抑制糖酵解，血液需要酸化。

关键词：血糖；氟化钠抗凝管；离心；放置时间；酸化

中图分类号：

文章编号：1673-8640(2015)01-061-03R446.1

文献标志码：码：A

DOI：10.3969/j.issn.1673-8640.2015.01.015

作者简介：王路，女，1989生，学士，主要从事分子生物学检测工作。

通讯作者：程江，联系电话：0993-2850957。

收稿日期：(2014-03-23)

血浆葡萄糖(简称血糖)检测是目前临床生化检验的常规项目。糖尿病的诊断和治疗有赖于准确的血糖检测结果。分析前阶段质量保证的重要性在于保证检验结果能真实、客观的反映患者当前病情或健康状态[1]。在实际工作中，由于血液离体后会发生糖酵解而消耗血糖，若不及时离心，则不能反映受检者的真实状况。为提高血糖检测分析前质量，我们探讨了氟化钠抗凝管离心前、后放置时间对血糖测定值的影响。

材料和方法

一、材料

1.采血管(1)肝素钠-氟化钠采血管：由浙江拱东医疗科技有限公司提供(批号：1206267)；(2)自制酸化氟化钠抗凝管(pH值5.5)：准确称取枸橼酸0.26 g、枸橼酸钠·2H2O 0.7 g、肝素钠0.3 mg、氟化钠6 mg，加蒸馏水20 mL溶解，用经高压灭菌的玻璃试管分装，每瓶0.1 mL，50 ℃烤箱烘干备用。

2.仪器与试剂采用葡萄糖氧化酶法检测血糖。仪器为ROCHE Modular DPP全自动生化分析仪，试剂为原装配套试剂(批号：681598-01)。校准品为Roche c.f.a.s校准品(批号：172156-01)。室内质控品由Bio-Rad 公司提供(批号：4737-04、4738-04)。

二、方法

1.标本采集10 min内采集40份志愿者静脉血液标本(5个人同时为志愿者抽血)，同一份血标本分别置于5支肝素钠-氟化钠管和5支自制酸化的氟化钠管内，每管内约2 mL，充分混匀，随机分为两组，每组20份，一组立即离心，分别检测即刻及放置室温0.5、1、2、4 h的血糖。另一组分别于检测即刻及放置室温0.5、1、2、4 h后再离心的血糖。

2.质控当天标本测定前进行质控品的测定。结果在控时，再进行标本测定，并同时加测质控品，2次质控结果均在控视当天标本测定结果有效。

三、统计学方法

结果

肝素钠-氟化钠管和酸化氟化钠管离心前放置0.5、1、2、4 h的血糖测定值与即刻测定值比较差异均有统计学意义(P<0.05)，且两种抗凝管之间差异亦有统计学意义(P<0.05)；肝素钠-氟化钠管和酸化氟化钠管及时离心后放置0.5、1、2、4 h的血糖测定值与即刻测定值比较差异均无统计学意义(P>0.05)，且两种抗凝管之间差异亦无统计学意义(P>0.05)。见表1。

肝素钠-氟化钠管和酸化氟化钠管分别在即刻、0.5、1、2、4 h离心检测血糖浓度的差值(即肝素钠-氟化钠管测定值-酸化氟化钠管测定值)和离心后在即刻、0.5、1、2、4 h检测血糖浓度的差值结果见表2，其变化曲线见图1。

重复测量数据的方差分析显示离心前、后放置不同时间的肝素钠-氟化钠管和酸化氟化钠管测定血糖浓度的差值有统计学意义(P<0.05)。

组别抗凝管即刻0.5h1h2h4h离心前肝素钠-氟化钠管6.05±1.095.60±1.00*#5.52±0.98*#5.38±0.97*#5.37±0.96*#酸化氟化钠管6.04±1.096.03±1.096.02±1.086.05±1.106.03±1.09离心后肝素钠-氟化钠管5.29±0.985.25±1.005.32±1.015.35±1.005.24±1.02酸化氟化钠管5.32±0.965.30±0.975.36±0.985.28±0.965.34±0.98

注：与即刻比较，*P<0.05；与酸化氟化钠管比较，#P<0.05

组别即刻0.5h1h2h4h离心前-0.012±0.0240.425±0.052*0.507±0.045*0.667±0.043*0.668±0.034*离心后-0.032±0.017-0.052±0.037-0.040±0.0320.064±0.031-0.098±0.024

注：与即刻测定差值比较，*P<0.05

图1　离心前、后放置不同时间的肝素钠-氟化钠管和

讨论

血糖作为反映糖代谢紊乱的重要指标，其结果的准确性直接影响到患者的诊断与治疗。有研究显示，临床上血糖分析的误差主要来源于标本的采集与保存(5%～10%)，远高于实验室分析误差(<3%)[2]。

在临床工作中，血液标本一般在采集后2 h左右才能送往检验科。在室温条件下，血液离体后标本中血糖酵解率为每小时5%～7%。在血细胞(白细胞、红细胞、血小板)增多的情况下，降解的速度更快。为了防止血液离体后血糖发生酵解，氟化钠是一种较理想的抗凝剂。当应用葡萄糖氧化酶法测定血糖时，采用肝素钠-氟化钠作为抗凝剂效果最好[3]。

氟化钠采血管通过阻断糖酵解途径中的烯醇化酶，抑制甘油3磷酸脱氢酶的活性，使葡萄糖分解抑制。但有报道显示氟化钠抑制糖酵解不是直接的，完全抑制延长达4 h[4]。氟化钠采血管中血样离心前放置时间增加会导致葡萄糖浓度测定值降低[5]。立即稳定血糖，防止离心前糖酵解的发生，额外的酸化是非常有必要的[6]。因为枸橼酸缓冲液(pH值5.5)的pH值远离糖酵解过程中的3个关键酶(己糖磷酸激酶、磷酸果糖激酶和丙酮酸激酶)的最适pH值，而且氟离子能够竞争性的抑制酶的作用点，使酶失活，两者的协同作用能够迅速抑制糖酵解。本研究采用酸化氟化钠管和肝素钠-氟化钠管采集血液标本，并放置不同时间后离心检测血糖浓度。结果显示未离心放置不同时间的测定值与即刻测定值比较差异有统计学意义(P<0.05)，与文献报道[4]一致。由此说明氟化钠作为糖酵解的抑制剂不够充分，酸化可取代氟化钠作为推荐方法。本研究结果还显示酸化氟化钠管和肝素钠-氟化钠管立即离心，再放置不同时间后检测血浆葡萄糖浓度，结果差异无统计学意义(P>0.05)。

综上所述，在检测血糖浓度，尤其是在进行75 g葡萄糖耐量试验时，如使用氟化钠抗凝管采集血液标本且不能及时离心、送检，则氟化钠抗凝管需要额外的酸化，这样才可以获得精准的血糖浓度。

参考文献

[1]张卫民，刘树业.正确的标本采集是准确检测结果的开始[J].中华检验医学杂志，2013，36(1):90-91.

[2]BRUNS DE，KNOWLER WC. Stabilization of glucose in blood samples: why it matters [J]. Clin Chem，2009，55(5):850-852.

[3]田亚平，邱彩琴.血糖测定的方法学进展与临床应用[J].中华检验医学杂志，2008，31(3):355-360.

[4]GAMBINO R， PISCITELLI J, ACKATTUPATHIL TA, et al. Acidification of biood is superior to sodium fluoride alone as an inhibitor of glycolysis[J]. Clin Chem，2009，55(5):1019-1021.

[5]张吟眉，王京，李国权.草酸钠-氟化钠采血管中血样离心前放置时间对血浆葡萄糖测定的影响[J].检验医学与临床，2013，10(4):429-430.

[6]YAGMUR E, VAN HELDEN J, KOCH A, et al. Effective inhibition of glycolysis in venous whole blood and plasma samples[J].Laboratoriumsmedizin, 2012, 36(3):169-177.

(本文编辑：龚晓霖)