外阴部清洁操作对尿液生化指标检测结果的影响

王金铎， 崔云卿， 张 慧， 王艳华， 李英华

（复旦大学附属上海市第五人民医院，上海 200240）

尿液中各项指标的变化在一定程度上可以反映泌尿系统、内分泌系统、肾脏系统、心血管系统等的病变程度，是人体具有重要检验意义的样本[1]。与血液样本等其他样本相比，尿液样本种类分为晨尿、随机尿、餐后尿、24 h尿等，采集程序相对复杂，规范较为困难。正确、合理、规范的尿液收集操作是保证尿液检验结果真实、可靠的前提。虽然尿液样本明确规定应采集中段尿，并在冷藏条件下运送，在尽可能短的时间内进行检测[2]。但在实际操作中，尿液样本一般由被检者自行收集，其收集过程的规范性无法得到保证。为探索非中段晨尿对尿液生化指标和微生物测定的影响，本研究模拟常规的体检条件和体检流程，探讨外阴部清洗与否对尿液样本各项指标检测结果的影响，为晨尿样本及肾病患者生物样本库中尿液样本的收集提供参考。

1 材料和方法

1.1 研究对象

选取2020年5月复旦大学附属上海市第五人民医院参加健康体检的志愿者35名，其中男16名、女19名，年龄7～85岁。所有对象均被明确告知留取中段尿的操作流程和注意事项。收集所有对象晨尿的中段尿样本。将未清洁外阴部志愿者的晨尿样本作为未清洗组，其中女性样本19例、男性样本16例。为消除由饮食结构变化可能带来的检测结果的变化，以第2天和第3天用50 mL 0.9%NaCl溶液清洁外阴部3次后收集的晨尿样本作为清洗组，其中男性样本32例、女性样本36例。

1.2 方法

尿液样本以400×g离心10 min，待测。采用cobas C311全自动生化分析仪（瑞士罗氏公司）及配套试剂检测尿液氯离子（chloridion，Cl-）、钾离子（kalium ion，K+）、钠离子（sodion，Na+）浓度。采用cobas 8000全自动生化分析仪（瑞士罗氏公司）及配套试剂测定尿液微量白蛋白（microalbumin，mAlb）、肌酐（creatinine，Cr）、总蛋白（total protein，TP）、α1-微球蛋白（alpha1-microglobulin，α1-MG）、β2-微球蛋白（beta2-microglobulin，β2-MG）、IgG、转铁蛋白（transferrin，TF）、钙（calcium，Ca）、磷（phosphorus，P）和葡萄糖（glucose，Glu）。采用VITEK 2 Compact自动化鉴定药敏仪（法国生物梅里埃公司）对尿液中的微生物进行菌落计数，采用Maldi-Tof Biotype质谱仪（德国BRUKER公司）鉴定菌种。

1.3 统计学方法

采用SPSS 22.0软件进行统计分析。呈正态分布的数据以±s表示，多组间比较采用方差分析。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

未清洗组男、女性尿液样本菌落总数差异有统计学意义（P<0.05），细菌种类以葡萄球菌、粪肠球菌、格式乳杆菌和卷曲乳杆菌为主；尿液Cl-、K+、Na+、Alb、Cr、TP、α1-MG、β2-MG、IgG、TF、Ca、P和Glu差异均无统计学意义（P>0.05）。清洗组男、女性尿液样本菌落总数、Cl-、Na+、Cr、α1-MG、IgG、TF差异均有统计学意义（P<0.05），K+、Ca、P 、Alb、β2-MG和Glu差异均无统计学意义（P>0.05）。清洗组男性与未清洗组男性比较，尿液IgG差异有统计学意义（P<0.05），尿液菌落总数、Cl-、K+、Na+、Alb、Cr、TP、α1-MG、β2-MG、TF、Ca、P和Glu差异均无统计学意义（P>0.05）。清洗组女性与未清洗组女性比较，各项指标差异均无统计学意义（P>0.05）。

表1 清洗组与未清洗组男性、女性尿液样本各项指标检测结果的比较 ±s

表1 清洗组与未清洗组男性、女性尿液样本各项指标检测结果的比较 ±s

注：与未清洁组男性比较，*P<0.05、**P<0.01；与清洁组男性比较，#P<0.05、##P<0.01；空白表示无此项。

菌落总数（CFU/L）未清洗组男性 16 3.67±0.75 118.56±10.84 14.25±1.45 30.27±2.80 148.38±10.64 75.13±6.74 9.42±3.80女性 19 5.32±1.52 99.85±6.78 11.23±1.25 29.96±4.11 132.16±12.13 83.84±12.40 42.32±8.37**##清洗组男性 32 7.34±1.72 125.37±7.62 16.38±1.00 39.76±3.48 146.12±8.07 82.28±5.91 6.25±1.88女性 36 4.19±0.80 107.91±10.95# 12.47±1.20# 33.13±3.42 120.90±8.21# 68.83±5.57 36.54±6.32##组别 α1-MG/（mg/L）组别 例数 mAlb/（mg/L）Cl-/（mmol/L）Cr/（mmol/L）K+/（mmol/L）Na+/（mmol/L）TP/（mg/L）IgG/（mg/L）β2-MG/（mg/L）TF/（mg/L）Ca/（mmol/L）P/（mmol/L）Glu/（mmol/L）未清洗组男性 1.66±0.28 0.13±0.02 0.70±0.18 0.74±0.08 4.12±0.57 26.74±2.74 0.43±0.04女性 2.13±0.97 0.19±0.05 1.01±0.37 0.78±0.09 4.15±0.60 21.26±2.68 0.36±0.07清洗组男性 3.06±0.84 0.11±0.01 1.95±0.40* 0.81±0.07 4.33±0.37 30.10±2.33 0.48±0.04女性 1.26±0.27# 0.17±0.03 0.79±0.24## 0.64±0.04# 3.35±0.27 23.81±2.45 0.37±0.04

3 讨论

本研究结果显示，未清洗组男性与女性的尿液菌落总数虽均在参考区间（<100 CFU/L）内，但女性的菌落总数远高于男性（P<0.01），其他生化指标男、女性之间差异均无统计学意义（P>0.05）。女性菌落总数远高于男性可能是导致女性尿路感染率高于男性的原因之一[3]。

本研究结果显示，清洗组女性菌落总数远高于男性（P<0.01），说明进行简单的外阴部清洁操作后女性尿液样本受微生物污染的程度仍显著高于男性。清洗组男性尿液α1-MG、IgG、TF水平均高于女性（P<0.05），可能与男性清洁后微生物减少、降解效应降低有关。由此可见，虽然男、女性菌落总数均在参考区间内，但带菌量的差异可能会导致微生物的降解作用出现明显不同，进而使尿液中蛋白类指标的检测结果出现差异。体检时的晨尿样本一般由体检者自行在家取样，然后携带至体检点进行处理并检测，从样本收集到检测时间的间隔一般为1～3 h[4]。郭瑞莹[5]的研究结果显示，肠球菌、大肠埃希菌、葡萄球菌均对尿液红细胞的检测结果有影响。本研究在尿液样本中分离到的菌株包括粪肠球菌、葡萄球菌、格式乳杆菌和卷曲乳杆菌。但何种细菌对尿液蛋白类指标检测的影响最大以及菌落总数低于多少在4 h内不影响蛋白类指标检测还有待于进一步研究。本研究结果还显示，清洗组男性尿液IgG水平高于未清洗组男性（P<0.05）。提示外阴部清洁操作对男性尿液IgG水平有明显影响。另外，男性尿液Cl-、Na+水平均高于女性（P<0.05），这可能与男性采用0.9%NaCl溶液清洁后取样易受0.9%NaCl溶液残留影响有关。

本研究结果显示，清洗组女性与未清洗组女性比较，尿液各项指标差异均无统计学意义（P>0.05）。说明女性在采集中段尿时，仅依靠简单的清洗擦拭操作并不能降低细菌污染对尿液各项指标检测结果的影响。因此，在留取用于生物样本库的样本时，建议女性在采集中段晨尿样本前，使用外阴部用清洁类产品彻底清洁后再进行样本采集。另外，样本库的晨尿样本采集也可以考虑用二次晨尿采集的方式降低尿液样本从收集到检测的时间间隔过长的影响[6-7]。

尿液样本不加防腐剂在常温下保存对尿液菌落总数影响较大[8]。在实际工作中，体检晨尿样本采集后低温运输较为困难。因此，建议在向体检者发放晨尿样本采集瓶时除发放冰袋外，还应发放对检测指标不产生影响的防腐剂，如甲苯、二甲苯、尼伯金乙酯、戊二醛、叠氮化钠、对羟基苯甲酸酯、尼伯金丁酯等，这对于保证尿液检测结果的准确有着重要的意义[9-10]。

综上所述，简单的外阴部清洁操作对男性尿液蛋白类指标的检测有明显影响，但对女性尿液相关指标的检测无影响。中段尿采集是否应在执行清洁操作后进行值得临床关注。