肝硬化患者血清血管紧张素转化酶与C反应蛋白的变化分析

晏 峰， 徐伟珍， 揭伟霞， 任振唤

(丽水市人民医院检验科，浙江丽水323000)

有研究显示肝硬化的发生、发展存在局部肾素-血管紧张素-醛固酮系统(RAAS)变化［1-2］，血管紧张素转化酶(angiotensin-converting enzyme，ACE)在其中发挥重要作用。肝硬化的进展过程同时也伴随着炎症变化。C反应蛋白(CRP)是亚临床炎症标志之一，也是脏器发生硬化性疾病的介质。为此，我们探讨了肝硬化患者ACE活性及CRP水平的变化。

材料和方法

一、研究对象

1.肝硬化组 选取2012年1月至2012年6月丽水市人民医院肝科门诊和住院并确诊为肝炎后肝硬化的患者275例，其中男192例，女83例，年龄38～66岁，所有患者乙型肝炎表面抗原(HBsAg)均为阳性，且均排除合并有继发感染、肝脏占位性病变、门静脉血栓形成、肝内胆管扩张及长期酗酒者。将肝硬化患者按肝功能Child-Pugh分级标准分为A、B、C 3级，其中A级96例、B级118例、C级61例。

2.对照组 随机选取丽水市人民医院体检中心健康体检者241名，其中男152例，女89例，年龄23～66岁，超声检查无脂肪肝，无慢性病毒性肝炎、酒精性肝炎、肝硬化或其他严重躯体性疾病史。

二、方法

1.样本留取 所有研究对象采集清晨空腹静脉血3 mL，分离血清后－20℃保存待测。

2.试剂和仪器 ACE试剂由温州伊利康公司提供(批号111102);CRP试剂由四川迈克公司提供(批号 1211061)。检测均在Olympus AU5421全自动生化分析仪上进行。

3.测定方法 CRP采用免疫透射比浊法检测。ACE活性采用连续监测法检测，基本原理为样品中ACE催化呋喃酰基-L-苯丙氨酰甘氨酰甘氨酸水解，生成苯丙氨酰基和双苷肽，引起340 nm处吸光度下降，吸光度下降速率与ACE活性成正比。

4.参考区间 根据本实验室设定的参考区间:ACE为16～65 U/L，CRP为0.0～10.0 mg/L。

三、统计学方法

结 果

一、对照组与肝硬化组血清ACE活性及CRP水平比较

肝硬化组A、B、C 3级ACE活性及CRP水平均高于对照组(P＜0.01)，且肝硬化组 A、B、C 3级ACE活性及CRP水平依次增高，各级间差异均有统计学意义(P均＜0.01)。见表1。

表1 4组血清ACE活性与CRP水平比较

二、肝硬化组和对照组阳性率比较

以ACE活性＞65 U/L为阳性判断值，肝硬化组阳性率为74.5%，对照组为5.4%，2组间差异有统计学意义(χ2=251.7，P＜0.01)。

以CRP＞10 mg/L为阳性判断值，肝硬化组阳性率为68.7%，对照组为8.7%，2组间差异有统计学意义(χ2=191.7，P＜0.01)。

三、肝硬化患者患病率与CRP的关联性

以血清CRP=10 mg/L为截点［3］，将所有研究对象分为低CRP(≤10 mg/L)组(306例)和高CRP(＞10mg/L)组(210例)。高CRP组中肝硬化患病率为90.0%(189/210)，低CRP组中肝硬化患病率为28.1%(86/306)，前者患病率是后者的3.2倍。以低CRP组为参照组，高CRP组肝硬化患病风险的优势比(OR)=7.937(95%CI:6.132～10.530，P＜0.01)。

四、肝硬化患者血清ACE与CRP的关系

以ACE=65 U/L为截点，将275例肝硬化患者分为高ACE(≥65 U/L)组(158例)和低ACE(＜65 U/L)组(117例)。高ACE组血清CRP水平［28.6(14.8～86.3)mg/L］明显高于低 ACE 组［15.5(4.3～42.7)mg/L］(P＜0.01)。

五、血清ACE活性与CRP水平相关性分析

血清ACE活性与CRP水平呈正相关，回归方程为Y=1.715X+13.77，r=0.468，P＜0.01。

讨 论

ACE是细胞内普遍存在的金属蛋白酶，为血管紧张素Ⅰ(AngⅠ)转变为血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)的限速酶，是调节RAAS与缓激肽系统的重要酶［4］。Rao［2］的研究发现肝硬化患者血肾素-血管紧张素系统(RAS)异常激活，一方面在于外周血管扩张，有效循环血量不足导致RAS活跃、AngⅡ增加;另一方面AngⅡ表达的变化受肝脏功能影响，肝脏损伤的局部反应或者存在RAS系统。Yoshiji等［5］的研究证实未经治疗的肝硬化患者ACE活性显著升高。本研究结果显示肝硬化组ACE阳性率远高于对照组(P＜0.01)，且肝硬化 A、B、C 级患者血清ACE活性依次增高(P均＜0.01)，表明随着肝硬化患者肝功能损伤程度的加重，血清ACE水平也呈现出逐渐升高。推测肝硬化患者可能存在RAS持续过度激活，这与Bataller等［6］认为活化人体肝星状细胞能表达RAS和合成AngⅡ结果相一致。而AngⅡ是RAS的主要活性物质，能够刺激转化生长因子-β(TGF-β)的合成和分泌［7］。TGF-β能诱导肝细胞凋亡，抑制肝细胞再生，活化储脂细胞，抑制肝外基质降解，促进肝细胞外基质合成增加，调节细胞外受体表达，促进肝纤维化、肝硬化的发生、发展［7］。

肝硬化患者血清ACE升高的机制未完全明确，可能与以下因素有关:(1)ACE主要在肝脏代谢，肝硬化状态时肝功能低下，对ACE的有效清除减少;(2)机体在肝硬化炎症状态TGF-β合成和分泌增加，上调血管内皮细胞受体，促进血管内皮细胞增生，导致释放更多的ACE入血;(3)肝硬化患者存在局部RAS持续过度激活;(4)肝硬化门脉高压形成后，一方面肺内分流增加，出现低氧血症，刺激ACE释放，另一方面ACE灭活作用减弱。近年有文献［8］报道 ACE抑制剂培哚普利(PE)与干扰素组合治疗，可完全阻止肝纤维化的发展，而且PE的作用显著强于干扰素。有研究证实ACE抑制剂可以延缓大鼠肝纤维化进程，减轻肝细胞的损伤［9］。

本研究结果显示肝硬化患者患病率会随着血清CRP水平的升高而增加，伴随着肝损伤程度和炎症活动的加剧，血清CRP水平出现明显变化。这与慢性HBV患者由于肝脏受损，出现不同程度的肝细胞坏死，引起机体炎症反应，导致肝细胞合成CRP增加;且随着疾病的不断发展，肝硬化和肝癌患者肝损害进一步加重，肝细胞合成CRP也发生相应变化的结论［10］相符合。CRP是急性时相反应蛋白(APP)中最重要的蛋白之一。而这种应激时APP产生的机制目前认为主要是在应激状态下，肝细胞及间质细胞特别是肝星状细胞中的核因子-κB(NF-κB)被激活后进入核内，与许多细胞因子及炎症介质基因5'端调控区的κB序列结合而启动这些基因的转录，使其血浆水平明显升高。细胞因子产生增多后，通过细胞内信号转导途径(具体途径目前并不完全清楚)，刺激肝细胞与肝星状细胞产生及释放APP［11］。已知白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-6(IL-6)及肿瘤坏死因子(TNF)等细胞因子能诱导CRP急速上调。创伤引起肝星状细胞产生IL-1，肝损伤后患者少量的IL-1增加也可引起显著的代谢反应［12］。与低CRP组相比，高CRP组肝硬化患病风险的OR为7.937(95%CI:6.132～10.530，P＜0.01)。也说明肝硬化肝损伤后CRP明显升高。CRP升高可能是由肝细胞及肝星状细胞分泌大量炎症因子刺激产生，而这种变化可能导致肝细胞及肝星状细胞结构、功能和代谢的改变。

本研究还证实高ACE活性的肝硬化患者血清CRP水平明显高于低ACE活性患者(P＜0.01)，二者间具有一定的正相关(r=0.468，P＜0.01)。如能对肝硬化患者同时进行针对性抑制ACE活性及降低炎症反应，阻缓其进展，对于治疗及愈后具有一定的临床意义。

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