生殖支原体感染的临床分布和耐药性分析

曾丽洪，张小团，曾 童，刘卓然

(南华大学附属第二医院检验科，湖南 衡阳 421001)

生殖支原体(mycoplasma genitalium，MG)是引起人类非淋菌性病的主要病原体之一，目前临床上最常见的是解脲脲原体(ureaplasma urealyticum, Uu)和人型支原体(mycoplasma hominis, Mh)[1]。此外，MG的感染也是临床不孕不育的生物因素之一，同时还可以引起盆腔炎、流产、死胎、早产等[1-2]。Mh引起生殖道以外感染也偶有报道，如伤口组织感染、血流和颅内感染等[3-4]。支原体属是一种特殊的病原体，无细胞壁结构，对所有作用于细胞壁的抗生素不敏感。近年来对MG的耐药报道提示，Uu和Mh具有较高的耐药率，且呈现明显的地域差异[2，5]。为了解本地区支原体的耐药情况，本文现就本院2014至2019年MG体外培养及药敏结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集2014年1月1日至2019年12月31日就诊于本院疑似MG感染患者的支原体培养及药敏结果和患者的基本资料，同一患者多次送检只分析第一次阳性标本的资料。排除标准：检出有淋球菌感染者。共纳入分析病例资料502例，送检标本包括阴道分泌物或宫颈分泌物、尿道拭子、前列腺液和精液等。患者年龄6～81岁，中位年龄34岁，其中男性患者67例，女性435例。

1.2 主要仪器与试剂

DHP500型电热恒温培养箱购于北京市永光明医疗仪器有限公司，支原体培养鉴定计数药敏试剂盒(液态型)购于郑州安图生物工程有限公司，该试剂可同时鉴定解脲脲原体和人型支原体，包含12种抗生素：交沙霉素、美满霉素、强力霉素、加替沙星、左氧氟沙星、阿齐霉素、克拉霉素、红霉素、罗红霉素、甲砜霉素、司巴沙星、克林霉素。

1.3 方法

采用一次性的无菌拭子，由临床医生按照试剂要求进行标本采集，并在2 h内送检支原体培养。支原体培养采用液体培养，由检验医师严格按照无菌要求和试剂说明书进行操作，置于37 ℃空气培养箱中连续培养48 h，期间每24 h记录支原体生长状况并严格按照试剂说明进行定量和结果判断。对结果异常或者全耐药的标本，通知患者重新采样进行培养。

1.4 支原体鉴定及药敏判断标准

根据安图生物的支原体鉴定计数药敏试剂盒(液态型)的说明书规定，C-孔为阴性对照，C+孔为阳性对照，变红表示有支原体生长，Uu孔变红，表示解脲脲原体阳性，Uu>104cfu/mL孔变红，表示菌量>104cfu/mL；Mh孔变红，表示人型支原体阳性，Mh>104cfu/mL孔变红，表示菌量>104cfu/mL。每种抗生素设高浓度和低浓度两个孔，两孔都变红色表示耐药；低浓度孔变红色，高浓度孔保持黄色表示中介，两孔都保持黄色为敏感；其它类型需符合药敏。

1.5 统计学处理

采用SPSS 24.0统计软件对男性和女性患者生殖支原体培养和临床分布情况的差异进行统计学分析，男女性别在生殖支原体培养和临床分布的差异采用阳性率进行比较，使用χ2检验，P<0.05为差异有显著性。采用耐药率描述生殖支原体的耐药性，构成比描述支原体的多重耐药情况。

2 结 果

2.1 MG感染的检出情况

2014年至2019年本院接诊的502例疑似MG感染患者的标本中，共检出支原体阳性334例，检出阳性率66.5%，其中男性患者67例，检出18例，阳性率26.9%，女性患者435例，检出316例，阳性率72.6%。女性患者MG感染率显著高于男性患者(χ2=2694，P<0.001)，见表1。从标本分布情况看，435例女性标本全部来自于阴道或宫颈分泌物，67例男性标本包括62例尿道拭子(16例阳性)，3例前列腺液(1例阳性)和2例精液标本(1例阳性)。从支原体检出阳性患者的年龄分布来看，中位年龄为33岁，以20～45岁(87.1%)的人群为主。

表1 不同性别患者MG感染的情况 (例)

MG:生殖支原体

2.2 MG感染的临床分布

对不同性别和不同支原体感染的临床分布情况进行分析显示，334例支原体阳性标本中，单纯Uu感染检出293例，占比87.7%，单纯Mh感染检出9例，占比2.7%，Uu+Mh混合感染检出32例，占比9.9%。比较Uu、Mh和Uu+Mh在男性和女性生殖道感染中的构成，未发现明显差异(P>0.05),见表2，提示生殖道支原体Uu和Mh在人群中的感染类型不存在性别差异。

表2 不同性别患者生殖道支原体感染的构成情况 (例)

2.3 MG对12种常用抗生素的耐药情况

对334例阳性患者的药敏结果进行分析。从整理的耐药情况看，MG对交沙霉素、美满霉素和强力霉素的耐药率最低，均小于2.0%，其次是加替沙星，耐药率为4.2%。耐药率最高的是克林霉素，高达53.5%。从不同类型支原体分析看，9例Mh和32例Mh+Uu除上述四种抗生素外，对其它八种抗生素均表现高度耐药，而单纯的Uu则只对甲砜霉素、司巴沙星和克林霉素具有较高的耐药率。从耐药谱可以看出，Uu对克林霉素和甲砜霉素高度耐药，而Mh则对其耐药率较低，见表3。

表3 334例MG阳性标本的耐药与敏感率 (%)

2.4 MG的多重耐药和交叉耐药的检出情况

334例支原体的多重耐药情况分析显示，对两种及两种以上抗生素耐药的支原体占50.0%(167/334)，这提示支原体的多重耐药情况已经很严峻。293例Uu感染组对两种及以上抗生素耐药率达43.0%(126/293)；9例Mh感染组中，均对两种及以上药物耐药，8例(88.9%)对四种及以上药物表现耐药；32例Uu合并Mh感染组中，28例(87.5%)表现为四种及以上抗生素耐药；多重耐药情况见表4。

表4 MG的多重耐药和交叉耐药情况 (例，%)

3 讨 论

支原体是非淋菌性病的主要病原体[1]。研究报道，支原体的感染和耐药性在经济发展、文化和生活习惯等不同的地域存在较大差异[6-8]。本研究分析了近年来本院MG感染患者的人口数据和细菌的耐药情况。结果显示，MG感染的检出率为66.5%，显著高于刘青林等[5]报道的长沙市MG总体检出率38.4%和钟敏等[9]报道的四川省人民医院MG的检出率38.7%，略低于张华萍等[7]报道的70.1%。其原因可能与多方面因素有关，如地域的气候和经济差异、卫生和生活习惯以及人口综合素质的差异等。

从MG感染的人口学分布上看，以女性患者为主，占比72.6%，且显著高于男性患者的26.9%(P<0.05)，但男女性别在不同种属MG感染中差异无统计学意义(P>0.05)。这与部分地区报道的情况类似[6-8]。女性患者感染率高于男性患者也可能与下列原因相关：(1)可能与女性生殖器的结构特征有关，女性生殖道内环境更容易受到破坏，使得定植的支原体形成感染；(2)隐性感染的男性患者导致女性的交叉感染；(3)服用避孕药对女性局部免疫和内分泌系统的影响；(4)男性患者取材不当或者标本量少，导致漏检或者假阴性。感染患者的中位年龄为33岁，20～45岁人群占87.1%，20岁以下和45岁以上人群的感染率较低，与以往报道的基本一致[7,9]。研究也提示，MG感染与性活跃、性伴侣个数和不洁性生活史密切相关，而20～45岁正为性活跃阶段，这或许进一步证实支原体感染与性活动之间的关系[7-8]。从MG类型上看，本院检出的MG感染以Uu为主，占87.7%，而Mh的检出率仅为2.7%，Mh合并Uu混合感染的检出率为9.9%，大致趋势与国内同行报道的一致[5,9]。

由于MG的细胞结构是由三层细胞膜包绕，而无细胞壁。因此该菌对所有作用于细胞壁的抗生素均不敏感，同时也不能被革兰染液着色。它主要通过与黏膜上皮细胞紧紧黏附而引起泌尿道生殖道感染，有研究显示MG与细菌性阴道病、输卵管炎和子宫内膜炎有关[1，10]。对于MG的治疗，大环内酯类和林可酰胺类的耐药性因支原体的种属而异，Mh对红霉素和其它十四、十五元大环内酯类耐药率高，而Uu则相反。本研究的结果显示，Mh对阿奇霉素、克拉霉素、罗红霉素以及红霉素的耐药率分别为66.7%、88.9%、77.8%、88.9%，而Uu的耐药率则分别为3.8%、4.1%、12.3%、7.2%。这恰好与支原体不同种的耐药模式相符，临床医生应重视不同种支原体耐药模式的差异，避免盲目地选用抗生素。值得注意的是，本研究数据提示，Uu对克林霉素的耐药率要高于Mh，与部分地区报道的耐药情况存在一定的差异，但均提示上述药物的耐药情况较为严峻[5,9,11]。左氧氟沙星虽然其耐药率为11.7%，但其敏感性仅为45.2%，与刘青林等[5]报道耐药情况存在较大差异，这可能与左氧氟沙星在临床的不规范使用，甚至地区间的用药习惯密切相关。Uu和Mh对交沙霉素、美满霉素和强力霉素的耐药率均非常低，耐药率低于4%，与国内外报道的情况基本相似[1,9,11-12]，这说明四环素类对支原体依然保持高度的敏感性，可作为严重感染患者的经验性用药。此外，对于Uu合并Mh混合感染时，其耐药性较单纯Uu或Mh感染的耐药性要高，与以往报道的情况相符[5,9,11-14]，这使得临床在日常抗菌治疗中需要尤其注意。

总之，MG在临床上具有较高的感染率，尤其是中年女性患者的感染率更高。从耐药问题上看，目前MG的多重耐药现象也已经越来越明显，且Uu和Mh的耐药模式有较大差异。临床应积极采样送检MG培养，关注MG鉴定及药敏结果，合理使用抗菌药物。