血清肿瘤异常蛋白与碱性成纤维细胞生长因子在宫颈癌中的表达水平及临床意义探讨

苗琴，刘亚敏

济南市第八人民医院病理科，山东济南 271104

宫颈癌（cervical cancer，CA）是女性发病率、病死率均居于前列的恶性肿瘤，受到女性的广泛关注[1]。CA的发病与初次性生活年龄、不良性行为、人乳头状瘤病毒（human papilloma virus，HPV）感染等多种因素相关[2-3]。CA的预后与发现是否及时相关，早期CA患者的预后相对较好[4]。CA的筛查一般是通过肿瘤标志物指标、影像学，但其中依然有部分患者未能检出，导致错过最佳的干预时机[5-6]。血清肿瘤异常蛋白（tumor abnormal protein，TAP）是近年来肿瘤领域的新热点，有机会成为肿瘤诊断的标志物指标[7]。碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor，bFGF）是调节神经、血管形成的多肽生长因子，在机体中分布较广，可对多种细胞的生长、分化起到调节作用[8]。本研究选取2021年3月—2023年6月在济南市第八人民医院接受CA筛查的87例患者为研究对象，探讨TAP与bFGF在CA中的表达情况及临床意义。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择于本院接受CA筛查的87例受检者为研究对象，其中37例经病理学确诊为CA，29例患者是非CA的上皮内瘤变（intraepithelial neoplasia，IN）患者，21例健康者。受检者年龄25～74岁，平均（54.82±14.91）岁；有性生活史72例，无性生活史15例；有生育史46例，无生育史41例。其中：CA患者年龄25～72岁，平均（55.19±12.71）岁；有性生活史31例，无性生活史6例；有生育史21例，无生育史16例。IN患者年龄28～74岁，平均（54.29±12.52）岁；有性生活史24例，无性生活史5例；有生育史17例，无生育史12例。健康者年龄25～71岁，平均（54.67±12.29）岁；有性生活史例17，无性生活史4例；有生育史8例，13无生育史例。对比分析3组受检者的一般资料，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。患者均签署知情同意书，本研究已通过医院医学伦理委员会批准。

1.2 纳入与排除标准

纳入标准：①CA患者经病理学诊断得到证实；②所有患者均接受TAP、bFGF的筛查。

排除标准：①入组前已经接受化疗、放疗、免疫治疗者；②合并其他恶性肿瘤者；③合并严重精神性疾病者。

1.3 方法

①TAP 采集患者的空腹静脉血，离心机分离血清。使用TAP试剂盒并按照操作步骤（上海科艾博生物）处理，再利用检测传统图像分析仪进行观察，能够发现不规则类型圆形晶体颗粒、颗粒为淡绿色、淡黄色、棕色，且中心存在屈光性，四周因混合物较多呈黑色或墨绿色为阳性；无颗粒检出则为阴性。TAP凝聚物面积如＜121 μm2：视为正常，无明显的凝聚物；凝聚物面积121～225 μm2：视为凝聚物较小，建议进行肿瘤的进一步排查；凝聚物面积＞225 μm2：视为凝聚物较大，建议进行肿瘤的进一步排查。

②bFGF 采用免疫组织化学染色法检测，试剂购买自Santa Cruz公司，bFGF稀释浓度为1∶500。采集的组织标本使用多聚甲醛固定，石蜡包埋，制作成4 μm厚度的切片，切片后以磷酸盐缓冲液（phosphate buffer solution，PBS）冲洗，3 min，再以3%过氧化氢室温孵育10 min，PBS冲洗3 min，加入5%牛血清孵育10 min。滴加一抗，在4℃下孵育过夜，冲洗后滴加二抗室温孵育20 min，冲洗后加入链亲和素-过氧化物酶孵育20 min，冲洗后以二氨基联苯胺显色，苏木精复染，再经脱水、透明、封片处理完成制片。使用显微镜对切片进行观察，阳性为细胞质呈弥散的棕黄色，1个视野范围内阳性细胞≥10%；阴性为1个视野范围内阳性细胞＜10%。参考范围：0～64 U/mL。

1.4 观察指标

①对比各组患者的TAP、bFGF表达情况。

②分析不同TAP、bFGF 的 CA患者临床特征，包括年龄、FIGO分期、病理类型、浸润情况、淋巴结转移。

1.5 统计方法

采用SPSS 22.0统计学软件进行数据处理，符合正态分布的计量资料以（）表示，行t检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 3组受检者TAP、bFGF对比

CA患者的TAP、bFGF的水平均高于IN患者、健康者，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1 3组受检者TAP、bFGF对比()

表1 3组受检者TAP、bFGF对比()

组别CA（n=37）IN（n=29）健康者（n=21）tCA vs IN值PCA vs IN值tCA vs健康者值PCA vs健康者值tIN vs健康者值PIN vs健康者值TAP（μm2）251.26±25.96 135.15±12.93 56.93±8.53 22.015＜0.001 33.191＜0.001 24.144＜0.001 bFGF（U/mL）92.53±11.72 45.93±11.82 21.29±5.72 15.972＜0.001 26.077＜0.001 8.817＜0.001

2.2 TAP与CA患者临床特征的表达分析

不同FIGO分期、浸润情况、淋巴结转移不同的宫颈患者TAP、bFGF对比，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

表2 CA患者TAP、bFGF临床特征的表达分析

3 讨论

TAP是癌细胞异常增生过程中表现出的特征，由癌基因和抑癌基因突变后表达产生[9]。在肿瘤恶性病变的过程中，糖基转移酶、糖苷酶等逐渐失去活性，或受到外部因素影响，导致失去活性的酶被再次激活，这期间的过程会引起“异常糖基化”[10]。本研究对TAP实施检测，结果显示CA组患者的TAP达到（251.26±25.96）μm2，提示CA患者大部分TAP呈阳性表达，同时凝聚物面积较大。王亚通等[11]的研究中也分析了CA患者的TAP检出情况，其结果显示阳性率为87.72%，再次证实CA患者的TAP大多呈阳性表达。TAP阳性表达说明异常糖基化的程度高，反映此过程与CA的发病、进展密切相关。

bFGF属于撕裂原活性的多肽因子，可促进成纤维细胞、血管内皮细胞增殖，进而促进组织异常增生和肿瘤新生血管形成[12]。机体正常状态下bFGF呈阴性或弱阳性表达，而在肿瘤的形成和发展中，通过增加bFGF分泌可达到促进肿瘤增殖的作用[13]；其次，bFGF可促进新生血管形成，为肿瘤生长提供更多能量，也能够达到促进肿瘤生长的作用[14]。本研究中CA患者的bFGF表达水平相较IN、健康者均更高（P＜0.05），提示bFGF也参与了CA的发病、发展过程。刘松格等[15]的研究中，CA组的bFGF的阳性率为88.14%、瘤变组为59.15%、对照组为6.00%，反映出bFGF在CA的发病、发展过程中扮演重要作用。

综上所述，本研究结果表明CA患者大多TAP、bFGF呈现阳性表达，并且与临床特征存在一定相关性，提示TAP、bFGF可作为CA诊断、病情评估、预后预测的重要参数。