TB-IGRA在不同年龄儿童结核病诊断的敏感性和特异性分析

项蔷薇　李海燕　林　立　罗运春　张海邻　李昌崇

TB-IGRA在不同年龄儿童结核病诊断的敏感性和特异性分析

项蔷薇李海燕林立罗运春张海邻李昌崇

目的 探讨γ-干扰素释放试验（TB-IGRA）诊断技术在不同年龄儿童结核病诊断的敏感性和特异性。方法 对2014年1月至2015年3月25例结核病感染患儿及39例非结核患儿进行TB-IGRA、纯蛋白衍生物（PPD）试验、结核抗体检测，并作痰涂片分析。统计学分析比较不同方法的检测结果，并作工作特征曲线（ROC）分析。结果 TB-IGRA诊断儿童结核病的敏感度88%，特异度为94.8%。PPD取硬结＞10mm为阳性判断标准时其敏感度为76%，特异度为76.9%。与PPD试验比较，敏感度和特异度均高于PPD试验。对于＜6岁组，TB-IGRA和PPD敏感度一样，敏感度均为76.9%，TB-IGRA特异度为95.2%，PPD特异度为89.5%。但对于7～14岁组儿童，IGRA的敏感度为100%，特异度为94.4%。而PPD的敏感度和特异度为83.3%，特异度为80%。TB-IGRA的曲线下面积为0.925，PPD曲线下面积为0.833，提示与PPD比较，TBIGRA对检测儿童结核的诊断价值更佳。结论 TB-IGRA试验具有相对较高的敏感度和特异度，是诊断儿童结核的快速敏感方法。

结核病 诊断 儿童 干扰素r释放试验 PPD试验

儿童结核病在发展中国家占15%～20% ，在发达国家占3%～6%， 是引起发展中国家儿童死亡的重要原因之一［1］。体外γ-干扰素释放试验（IGRA） ，是通过检测机体的细胞免疫功能， 来判断是否存在结核分枝杆菌感染。目前认为，IGRA由于使用的抗原为结核分枝杆菌特异性蛋白而不受卡介苗接种及机体免疫状态的影响［2］，因而在筛查潜伏结核感染儿童中具有较高的特异度［3］。作者于2014年1月至2015年3月对25例结核病患儿进行检测，并选用39例非结核感染患儿作为对照，探讨该方法对儿童结核病及不同年龄儿童结核的临床诊断价值，现报道如下。

1　临床资料

1.1一般资料 肺结核病例来源于本院儿童呼吸科病房确诊的肺结核患儿。诊断标准［4］：对照组为在住院呼吸系统疾病儿童，排除结核菌感染、免疫性疾病、内分泌疾病、 HIV感染等疾病。病例及对照组按年龄分为两组，分别为0～6岁组，7～14岁组。排除标准：符合以下任意一项者即排除：（1）进行皮试和T-SPOT测定前使用糖皮质激素及其他免疫抑制剂的患儿。（2）本次入院前已接受抗结核治疗。共纳入结核病例25例，对照组39例。其中男36例，女28例。0～6岁组32例，7～14岁组32例。

2　结果

2.1TB-IGRA和PPD检测结果 见表1。

表1　TB-IGRA和PPD检测结果［n（%）］

2.2受试者工作特征曲线（ROC）分析 TB-IGRA的曲线下面积为0.925，PPD曲线下面积为0.83，提示与PPD比较，TB-IGRA对检测儿童结核的诊断价值更佳。2.3 不同年龄儿童TB-IGRA和PPD敏感度、特异度比较。见表2。

表2　不同年龄儿童TB-IGRA和PPD敏感度、特异度比较［n（%）］

2.4TB-IGRA和其他检测方法结果比较 见表3。

表3　TB-IGRA和其他检测方法结果比较

3　讨论

结核病是导致发展中国家儿童发病和死亡的重要原因。加强儿童结核病和潜伏结核感染的诊治，是控制结核病传播的重要手段。然而，儿童结核病诊断存在着较大困难。儿童结核病症状不典型、病原学检查阳性率较低等因素，均严重影响临床医师的诊断。本组 25例痰涂片检验仅1例阳性，阳性率仅4%，因此，痰涂片检验并非儿童结核诊断的首选。而结核菌培养法周期较长、要求比较高，且需在一定条件的实验室进行，限制了其在临床的应用。以结核抗体检测为代表的免疫学诊断方法在临床被广泛应用，但由于结核分枝杆菌是一种胞内寄生菌，机体的抗结核免疫主要依赖于特异性的细胞免疫，因此结核抗体检测的特异性和敏感度均会受到明显影响，本资料中结核抗体检测阳性率仅8.69%。

本资料检测结果显示TB-IGRA 诊断儿童结核病的敏感度为88%，特异性为 94.8%，与既往采用ELISPOT 法研究结果类似［5］，提示此两种方法检测结果一致性高，变异性小，对儿童结核病早期诊断有较高的应用价值。

本资料发现，虽然TB-IGRA试验的敏感度略高于 PPD 试验，但差异无统计学意义（P＞0.05）。但TBIGRA试验的特异性明显优于PPD，可能与PPD 为多种蛋白成分的混合物，每一批次试剂不完全相同，或与入选患儿不同，每个人对PPD反应有所差异有关。另外，TB-IGRA的ROC曲线下面积为0.925，PPD的ROC曲线下面积为0.833，提示与PPD比较，TBIGRA对检测儿童结核的诊断价值较高。

本文将入组患儿分成0～6岁年龄组和7～14岁年龄组，分别进行TB-IGRA和PPD敏感度和特异度分析，发现＜6岁组，TB-IGRA和PPD敏感度相同，敏感度均为76.9%，TB-IGRA特异度为94.7%，PPD特异度为78.9%。但7～14岁组儿童，IGRA的敏感度为100%，特异度为95%。而PPD的敏感度和特异度为83.3%，特异度为75%。这是因为TB-IGRA的结果依赖于机体内效应性免疫细胞，尤其是CD4+T 淋巴细胞的应答。儿童的T淋巴细胞组分随年龄的不同存在差异，越小的儿童越少，故对试验结果可能产生一定影响。

1 Marais BJ，Gie RP，Schaaf HS，et al. Children pulmonary tuberculosis：old wisdom and new challenges. Am J Respir Crit Care Med， 2006，173（3）：1078～1090.

2 Kim SH，Song KH，Choi SJ，et al. Diagnostic usefulness of a T-cell-based assay for extrapulmonary tuberculosis in immunocompro mised patients. AmJMed，2009，122（2）：189～195.

3 Detjen AK，Keil T，Roll S，et al.Interferon-r release assay improve the diagnosis of tuberculosis and nontuberculous mycobacterial disease in children in a country with a low incidence of tuberculosis.ClinInfect Dis，2007，45（3）：322～328.

4 中华医学会儿科学分会呼吸学组.中华儿科杂志编辑部.儿童肺结核的临床诊断标准和治疗方案（试行）.中华儿科杂志，2006，44（4）：249～251.

5 Lalvani A，Pareek M. Interferon gamma release assays：principles and practice. Enferm Infecc Microbiol Clin，2010，28（4）：245～252.

浙江省温州市科技局基金项目（y20130237）；卫生部国家临床重点专科（儿科呼吸）开放课题（20130215）

325000 温州医科大学附属第二医院、育英儿童医院

1.2方法 （1）采集患儿病史，进行胸部X线和/或胸部CT、纯蛋白衍生物（PPD）、结核抗体（ELISA法）、TB-IGRA及痰涂片查结核杆菌等检测。（2）TB-IGRA检测：肝素抗凝管采集静脉血 5 ml，使用北京万泰公司生产的试剂盒检测；TB-AB 检测为血清标本，使用南京大渊生物技术工程有限责任公司生产的试剂盒。检测方法与结果判读严格按照试剂盒说明书进行。结果≥14提示阳性，＜14为阴性。（3）PPD试验： 用0.1 ml（5U）的结核菌素PPD于左前臂掌侧前 1 /3 皮肤无瘢痕部位进行皮内注射，以出现7～8 mm大小橘皮样圆形皮丘为宜。72h 后测量硬结横纵直径（mm），取平均值作为PPD皮试结果。以硬结平均直径＜5mm或无反应为阴性， 5～9mm为+，10～19mm为++，＞20mm或伴有水疱、硬结为+++。

1.3统计学方法 采用SPSS21.0统计软件。计数资料采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。对TBIGRA和PPD结果作ROC曲线，比较其敏感度和特异度。