脑脊液培养病原菌分布及耐药性分析

张楠 戴蕾 朱文波 周万青 张之烽 沈瀚★

脑脊液培养病原菌分布及耐药性分析

张楠 戴蕾 朱文波 周万青 张之烽 沈瀚★

目的 探讨临床送检脑脊液培养病原菌分布及耐药情况，为临床合理使用抗生素提供依据。方法 采用whonet软件对2009年1月至2014年6月临床送检的脑脊液培养阳性病原菌分布及耐药性资料进行回顾性分析。结果 共分离出病原菌110株，其中革兰阳性（G+）球菌40株（36.4%），革兰阴性（G-）杆菌53株（48.2%），真菌15株（13.6%），G-球菌2株（1.8%）。主要病原菌分布为：鲍曼不动杆菌21株（19.1%）、表皮葡萄球菌11株（10%）、金黄色葡萄球菌8株（7.3%）和铜绿假单胞菌7株（6.4%）。药敏结果显示，G+球菌对万古霉素、利奈唑胺和替考拉宁敏感率最高；G-杆菌中，鲍曼不动杆菌耐药较严重，其药物敏感性均＜30%，其中阿米卡星敏感率为23.5%，铜绿假单胞菌和肺炎克雷伯菌的药物敏感性均较好。结论 临床送检脑脊液培养样本中以G-杆菌的分离率较高，耐药情况不明显，可为中枢神经系统感染的用药提供建议和参考。

脑脊液 细菌培养 抗生素 耐药 感染

中枢神经系统感染严重威胁人类生命，全球每年约100万人罹患细菌性脑膜炎，其中约17.3万人死亡［1］。在不同地区不同医疗机构，病原菌的流行病学分布和耐药情况都有所不同。作者回顾性分析本院2009 年1月至2014年6月脑脊液培养阳性标本病原菌分布及药敏结果，以期为临床合理用药提供参考。

1 临床资料

1.1 菌株来源 收集本院2009年1月至2014年6月患者脑脊液培养阳性病原菌共110株，同一患者相同菌株不进行重复统计。其中男性79例，女性31例，年龄37～95岁，平均（65±17）岁。所研究对象基础疾病包括脑血管病、脑外伤、颅内占位、慢性阻塞性肺疾病、慢性心力衰竭、心瓣膜病、胆道疾病、肝硬化以及肿瘤性疾病等。大肠埃希菌ATCC 25922、金黄色葡萄球菌ATCC 25923、铜绿假单胞菌ATCC 27853，肺炎克雷伯菌ATCC 700603、粪肠球菌ATCC 29212和白假丝酵母菌ATCC 90028，均购自卫生部临床检验中心。

1.2 菌株分离、鉴定及药敏 样本接种和病原菌分离培养及鉴定按照《全国临床检验操作规程》进行。采用法国生物梅里埃公司Vitek自动细菌鉴定仪进行菌株鉴定，哥伦比亚羊血琼脂平板、巧克力平板、M-H琼脂平板购自法国生物梅里埃公司，药敏纸片为英国Oxoid公司产品。药敏试验采用K-B法，药敏结果依据美国临床实验室标准化协会（CLSI）2012年版判定标准判读。抗菌药物纸片为：氨苄西林、哌拉西林、氨苄西林/舒巴坦、替卡西林/克拉维酸、哌拉西林/他唑巴坦、头孢他啶、头孢吡肟、氨曲南、亚胺培南、美洛培南、阿米卡星、环丙沙星、米诺环素、替加环素、青霉素G、苯唑西林、阿米卡星、高浓度庆大霉素、利福平、利奈唑胺、万古霉素、替考拉宁。

1.3 统计学方法 采用世界卫生组织细菌耐药性监测中心推荐的WHONET5.4软件对药敏数据进行统计分析，进行耐药性分析的病原菌采用患者首次分离株。

2 结果

2.1 菌种分布 110株病原菌中，革兰阳性（G+）球菌40株，占36.4%，革兰阴性（G-）杆菌53株，占48.2%，G-球菌2株，即脑膜炎奈瑟球菌，占1.8%，真菌15株，即新生隐球菌，占13.6%。

2.2 主要G-杆菌对常用抗菌药物的耐药情况 见表1。

表1 主要G-杆菌对常用抗菌药物的耐药情况（%）

2.3 主要G+球菌对常用抗菌药物的耐药情况 见表2。

表2 主要G+球菌对常用抗菌药物的耐药情况（%）

3 讨论

中枢神经系统感染严重威胁患者生命，早期诊断且合理的抗感染治疗非常重要，经验性用药多选用能够通过血脑屏障的抗生素如青霉素、第三代头孢、磺胺类等［2，3］。脑脊液培养阳性是确诊中枢神经系统感染的主要依据，在确定脑脊液细菌培养和药敏结果后合理进行抗生素用药调整，尽早控制颅内感染，降低病死率。本文旨在分析本院脑脊液感染细菌种类及耐药情况，以期为临床提供参考。

本资料显示，2009年1月至2014年6月本院中枢神经系统感染以G-杆菌为主，占48.2%，其中鲍曼不动杆菌最多，占19.1%，其次为铜绿假单胞菌和肺炎克雷伯菌，G+球菌中最多的为表皮葡萄球菌，其次为金黄色葡萄球菌和粪肠球菌。然而表皮葡萄球菌是院内感染的主要致病菌之一，为皮肤正常菌群，故在标本采集和检测中污染的可能性较大，作者检查病历显示有3例表皮葡萄球菌感染为无效，可视为污染菌。有文献报道［4，5］，G-杆菌比例高于G+球菌，此差异可能是本院患者来源地域差异和标本量相对较少的原因。值得注意的是，本资料中分离出引起细菌性脑膜炎的常见致病菌脑膜炎奈瑟球菌2例。除此以外，还有新生隐球菌15例，占分离总病原菌的13.6%。

分离出的G+球菌中，排在前三位的为表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌和粪肠球菌，葡萄球菌属为中枢神经系统感染极为重要的病原菌，本数据未发现耐万古霉素和利奈唑胺的菌株，万古霉素依然保持良好的抗菌活性，表皮葡萄球菌和金葡菌对青霉素类耐药率均为100%，对替考拉宁未发现耐药［5］，故针对葡萄球菌引起的颅内感染经验性用药上，可考虑联合使用替考拉宁。粪肠球菌中，高浓度庆大霉素耐药率为57.1%，其他抗生素均未发现耐药。

对于G-杆菌性颅内感染，鲍曼不动杆菌分离株数有逐年上升的趋势。本资料数据显示，鲍曼不动杆菌对大部分抗生素呈高度耐药，所有耐药率均＞75%，敏感率最高的依次为阿米卡星23.5%和哌拉西林/他唑巴坦20.8%，对替加环素和美洛培南的耐药率为80%和93.3%，可见中枢神经系统鲍曼不动杆菌感染耐药性依然严重［6～8］。铜绿假单胞菌的总体耐药性较低，除了氨苄西林、哌拉西林和米诺环素的耐药率为100%，亚胺培南的敏感率为55.6%，头孢他啶的敏感率为66.7%，其他抗生素敏感率均＞70%，其中阿米卡星的敏感率最高为100%，亚胺培南的敏感率有所偏低，值得关注。肠杆菌属的肺炎克雷伯菌的分离率，仅次于鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌，本资料数据显示肺炎克雷伯菌除了对氨苄西林的天然耐药性，哌拉西林的敏感率为60%，其他抗生素敏感率均＞80%，这表明脑脊液肺炎克雷伯菌感染，有较好的抗菌素敏感性。

脑脊液培养标本的留取是确诊病原菌和药敏结果的前提，由于脑脊液病原菌量少，脑膜炎奈瑟球菌等对外界环境抵抗力弱，应在抗生素使用前采集标本并及时送检和接种，有文献提出建议床边直接接种标本以提高脑脊液培养的阳性率［9］。本资料仅为回顾性数据分析，为提高颅内感染的快速诊断和抗生素的有效应用，还需要进一步研究。

1 Van de Beek D，de Gans J，Tunkel AR，et al.Community-acquired bacterial meningitis in adults.N Engl J Med，2006，354（1）：44～53.

2 赵振.1012份脑脊液标本的病原菌及耐药性分析.临床血液学杂志，2014，27（8）：665～670.

3 Tunkel A R，Hartman B J，Kaplan S L，et al.Practice guidelines for the management of bacterial meningitis.Clin Infect Dis，2004，39（9）：1267～1284.

4 母丽媛，吕晓菊，马晓波，等.2300份成年人脑脊液培养及菌株耐药分析.中国抗生素杂志，2007，32（4）：252～255.

5 徐明，石广志，唐明忠，等.1997～2010年某院神经外科患者脑脊液分离菌及其耐药性研究.中华实验和临床感染病杂志：电子版，2012，6（3）：202～208.

6 向光芳，李科，张媛媛，等.我院2010年1月－2011年7月神经外科脑脊液病原菌种类及耐药性分析.中国药房：2012，23（22）：2050～2052.

7 金亮.338份脑脊液细菌培养及药物敏感性情况分析.临床荟萃，2014，29（5）：552～555.

8 荆楠，唐明忠，刘志忠，等.神经内外科脑脊液标本细菌流行病学分布和耐药性分析.首都医科大学学报，2012，33（2）：143～147.

9 曾玉.化脓性脑膜炎脑脊液细菌培养88例.中国检验医学与临床，2000，1（4）：F003.

210008 南京大学医学院附属鼓楼医院检验科